生物化学实验指导

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1、生物化学实验指导主编：朴金花副主编：江旭东李晶编辑委员会：王昭欧芹张涛张鹏霞白大芳杨晶王跃新王明富鲁燕李志伟江旭东李晶朴金花目录第一部分生物化学技术概论1.实验记录和实验报告的书写…………………………………………………2.普通实验技术…………………………………………………………………3.实验样品的制备………………………………………………………………4.离心分离技术原理及使用方法………………………………………………5.电泳原理………………………………………………………………………6.分光分析原理…………………………………………………………………7.层析分离原理…………

2、………………………………………………………8.实验室规则…………………………………………………………………第二部分生物化学基本实验实验一维生素C的定量测定…………………………………………………实验二考马氏亮蓝G-250染色法测定蛋白质含量…………………………实验三蛋白质紫外分光测定法……………………………………………实验四血清脂蛋白琼脂糖电泳………………………………………………实验五血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳……………………………………实验六血清蛋白质乙酸纤维素薄膜电泳……………………………………实验七pH对唾液淀粉反应速度的影响………………………………………实验

3、八碱性磷酸米氏常数的测定……………………………………………实验九改良Mohun法测定血清谷-丙转氨酶活性…………………………实验十氨基转移作用…………………………………………………………实验十一离子交换层析分离混合氨基酸……………………………………实验十二胡萝卜素的柱层析分离……………………………………………第三部分生物化学综合实验实验十三脲酶凝胶过滤分离……………………………………………………实验十四血清蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳………………………实验十五质粒DNA的微量快速提取…………………………………………实验十六多聚酶链式反应（PCR）技术……………

4、…………………………实验十七蛋白质印迹分析（WesternBlot）……………………………………实验十八碱性磷酸酶比活性测定………………………………………………实验十九四唑盐比色法（MTT）法………………………………………………实验二十核酸的提取、定量测定………………………………………………实验二十一肝糖原提取与鉴定……………………………………………………第一部分生物化学概论本部分的内容为生物化学实验中所涉及的主要原理。介绍如何正确记录实验过程及书写实验报告的一般规则，是训练学生进行正规实验寻林的重要内容。普通实验技术包括玻璃仪器的洗涤，洗液的配制，吸量管的使用、混

5、匀的方法以及过滤、离心等一般实验室技术。实验样品的制备着重讨论在生物化学实验中，血液、尿液样品及组织材料的采集和处理，匀浆制备和组织浸出液制备。离心分离技术、电泳原理、分光分析、层析分离技术，重点讨论这些重要技术的原理，内容则尽可能简洁扼要，作为具体实验内容的参考。一.实验记录和实验报告的书写实验是在理论指导下的科学实践，目的在于经过实践掌握科学观察的基本方法和技能，培养学生科学思维、分析判断和解决实际问题的能力。也是培养探求真知、尊重科学事实和真理的学风，培养科学态度的重要环节。（一）实验记录记录实验中观察到的现象、结果和数据，及时地记录在激烈路本上。原始数据必须

6、准确简练、详尽、清楚。记录时不能夹杂主观因素，在定量实验中观测的数据，如称量物的重量、滴定管的读数、光密度值等，都应设计一定的表格，依据仪器的精确度记录有效数字。完整的实验记录包括实验日期、实验题目、目的、操作、结果。（二）实验报告实验结束后，应及时整理和总结实验结果及记录，按照下列顺序写出实验报告：1.实验名称（Thetitleofexperiment）：2.目的（Objective）：3.原理（Principle）：最好使用简式。4.操作步骤（Operationalprocedure）：5.实验记录6.计算与结果（CalculationandResults）：7

7、.讨论（Discussion）：对实验方法，实验结果和异常现象进行探讨和评论，以及对于实验设计的认识、体会和建议。操作者姓名，实验日期。二、普通实验技术（一）玻璃仪器的洗涤与清洁玻璃仪器的洗涤与清洁直接影响实验结果的准确性，因此玻璃仪器的洗涤工作是很重要的1.新购置玻璃仪器的清洗新购置来的玻璃仪器表面附着有游离碱质，应先用肥皂水洗刷后再用流水冲洗，浸泡于I－2％HCl中过夜，取出后再用流水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2－3次，在干燥箱中烤干或自然晾干，备用。2.使用过的玻璃仪器的洗涤·（1）一般玻璃仪器：烧杯、三角烧杯、试剂瓶、试管等，可先用洗衣粉或肥皂水刷洗，将器皿