应用cell-search system检测肾癌患者循环肿瘤细胞的方法探索

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1、学校代码：学号：10023200401042应用Cell．searchSystem检测肾癌患者循环肿瘤细胞的方法探索专业年级：姓名：北京协和医学院临床医学专业04级周春李汉忠(丰任医师教授)：l匕京协和医学院临床学院泌尿外科2012年6月目录英文缩写词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4Abstract．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．

2、．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．5、，．!．日U吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．7实验设备、试剂与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．13实验设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．13实验试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一14实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．15实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．18讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．2

3、2结{念⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．25不足与展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一29综j丕⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．30致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．36个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．37独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．39英文缩写词表中文摘要背景与目的循环肿瘤细胞(CirculatingTumorCell，CTC)已成为现在肿瘤

4、临床邻域的研究热点之一。目前对CTC研究较多且证实临床价值的肿瘤主要是乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌。在这些癌症中CTC己证实与肿瘤的无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)及治疗监测(MOT)有明确的关系，其潜在的临床价值包括肿瘤珍断和预测临床分期。’肾癌是泌尿外科最常见的恶性肿瘤之一。国内外对肾癌CTC检测的研究罕见。本研究拟探索目前国际上检测CTC最准确、最新的方法一细胞搜索系统(Cell—searchSystem，CSS)用以检测肾癌(RCC)患者CTC的可行性，及改良方法。方法选取2012年在北京协和医院泌尿外科住院及复诊的TNM分期Ill期和IV期的肾癌患者作为研究对象，采

5、取患者外周血之至少7．5ml，15—30。C保存于专用试管内，在96h内送检，CTC标记物选用与检测乳腺癌、前列腺癌、结直肠癌相同的抗细胞角蛋白(CK)8／18／19荧光抗体，用CSS对患者外周血进行CTC定量检测，评价CSS检测转移性肾癌CTC的检出率和可行性，并探讨改进方法。结果1、8例肾细胞癌患者外周血CTC定量检测结果均为阴性。2、1例患者外周血中发现较多CK8／18／19+和CD45+的双阳性细胞。3、用CSS检测III期和IV期肾癌CTC检出率无差异。结论1、用上皮细胞肿瘤标记物抗CK8／18／19抗体标记肾癌CTC，CSS检测III期和IV期肾癌患者血中CTC的方法检

6、出率低，可行性差。2、。肾癌CTC进入外周血后肿瘤细胞抗原发生变异，如CK8／18／19低表达甚至不表达，肿瘤细胞表达新抗原。3、不同的上皮肿瘤细胞表达抗原存在差异，抗CK8／18／19抗体不能作为所有上皮米源肿瘤的细胞标记物。4、要修正CSS检测肾癌CTC的方法，需寻找不同于传统上皮肿瘤细胞CK抗体的新标记物。关键词循环肿瘤细胞肾细胞癌细胞搜索系统抗细胞角蛋白8／18／19抗体AbstractBackgroundandObjectiveItisnowoneofthehotspotsinthefieldofclinicaloncologytostudyCirculatingTumo

7、rCell(CTC)．UptonowthestudiesofCTCanditsclinicalvaluehavefocusedonbreastcancer，prostatecancerandcolorectalcancer，inwhichCTChasbeenconfirmedtoconceITlwithprogression—fleesurvival(PFS)、overallsurvival(OS)andmonitoringoftherapy(MOT)．Thepote