高脂血症对大鼠基因组dna及bcl-2甲基化的影响

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1、分类号：R5单位代码：10752密级：公开学号：2009212宁夏医科大学硕士研究生学位论文高脂血症对大鼠基因组DNA及bcl-2甲基化的影响HyperlipidemiaAffectingGenomicDNA、Bcl-2MethylationinWistarRats学位申请人：王义勇指导教师：贾绍斌教授申请学位门类级别：医学专业名称：内科学研究方向：心血管内科所在学院：临床医学院论文完成日期：二○一二年四月宁夏医科大学研究生院NingxiaMedicalUniversityThesisforAp

2、plicationofMaster’sDegreeHyperlipidemiaAffectingGenomicDNA、Bcl-2MethylationinWistarRatsStudent’sName:WangYiyongSupervisor:ProfessorJiaShaobinSubjectCategory:MedicineMajor:InternalMedicineSpecialty:CardiovascularMedicineCollege:ClinicalCollegeCompleti

3、onDate:Apr.2012宁夏医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿＿＿＿年月日年月日宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文，同

4、意学校按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权宁夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿＿＿＿年月日年月日宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要高脂血症对大鼠基因组DNA及bcl-2甲基化的影响摘要目的探讨高脂血症(Hyperlipidemia，HL)对wistar大鼠主

5、动脉基因组DNA总甲基化水平及总甲基转移酶活力的影响。并进一步研究bcl-2基因启动子区甲基化及mRNA表达在hyperlipidemiawistar大鼠主动脉组织中的作用。方法将44只健康清洁级成年wistar雄性大鼠随机分为2组：对照组和高脂组，每组22只。对照组给予普通大鼠饲料，高脂组给予相应的配方饲料。喂养3个月后心脏取血检测血清中总胆固醇（totalcholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白胆固醇（lowdensitylipoprotein

6、-cholesterol，LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（highdensitylipoprotein-cholesterol，HDL-C)相关指标。留取主动脉组织行病理切片，HE染色。提取主动脉基因组DNA检测基因组DNA总甲基化水平;提取主动脉核蛋白检测基因组DNA总甲基转移酶（DNAmethyltransferase,DNMT）活力；采用nMSP（Nestedmethylationspecificpolymerasechainreaction）法检测对照组、高脂组大鼠主动脉组织bcl-2

7、基因启动子区甲基化变化；采用实时荧光定量RT-PCR法检测bcl-2基因在各组大鼠主动脉组织中mRNA的表达变化。用单因素方差分析及卡方检验对统计数据进行分析。结果1、高脂组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05），HDL-C与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。HE染色法结果显示：高脂组大鼠主动脉血管外膜增厚，见少许炎细胞浸润，滋养血管增生，血管中膜增厚，内弹性膜及中膜的弹性膜极度弯曲，内膜完整，内皮细胞变形突向管腔等早期动脉粥样硬化改变。2

8、、高脂血症可增加大鼠主动脉基因组DNA总甲基转移酶活力，促使基因组DNA去甲基化，与对照组相比，具有统计学意义（P＜0.05）。3、高脂血症可使大鼠主动脉bcl-2基因启动子区甲基化水平增高，与对照组相比，有统计学意义（P＜0.01），并降低bcl-2基因mRNA表达，与对照组相比，有统计学意义（P＜0.01）。结论1、高脂饲料喂养wistarI宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要大鼠3月，根据TC、TG、LDL-C、HDL-C血脂指标可成功建立高脂血症大鼠模型，且动物模型主动脉病理图片有AS