几种典型污染物对斑马鱼的甲状腺干扰效应

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1、SubmittedtoZhejiangUniversityofTechnologyforDoctorDegreeofEnvironmentalScienceandEngineeringTHETHYRoID．DISRUPTINGEFFECTSoFSEVERAI。TYPICALCoNTAMINANTSONZEBRAFISHCandidate：WenqingTuMajor：EnvironmentalScienceandEngineeringSupervisor：ChunmianLinandChaoXuCollegeofBiologicalandEnvironmentalEngineerin

2、gZhejiangUniversityofTechnologyMay,2014浙江工业大学学位论文原创性声明舢删圳IJ

3、JJ圳圳川JJIJJIJIJjJOJY2622709本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的研究成果。除文中已经加以标注引用的内容外，本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得浙江工业大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。作者签名：床走齑日期：加，啤j月弓日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留

4、、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权浙江工业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于1、保密口，在——年解密后适用本授权书。2、不保密日。(请在以上相应方框内打“√”)作者签名：赫齑导师躲怕学研日期：加侔日期：知ft缉r月移日厂月衫日几种典型污染物对斑马鱼的甲状腺干扰效应摘要本文以广泛使用的两种酰胺类除草剂一乙草胺(acetochlor,ACT)和丁草胺、三种拟除虫菊酯(syntheticpyrethroids，SPs)

5、一氯菊酯(permethrin，PM)，联苯菊酯(bifenthrin，BF)和功夫菊酯(五一cyhalothrin，2-CH)和一种抗消炎药一萘普生(naproxen，NPX)，为研究对象，以斑马鱼作为模式生物，围绕内分泌干扰效应，研究了它们的毒性作用机理。我们首先从内分泌干扰和免疫毒性相互作用的角度，研究了丁草胺的发育毒性、雌激素效应以及免疫毒性及机理，进而从对映体层面研究了乙草胺在发育毒性、甲状腺系统和免疫毒性上的对映体选择性及其机理。其次，从生物富集角度，我们在建立了三种SPs在斑马鱼幼鱼体内富集与消除动力学的基础上，研究了它们对斑马鱼甲状腺激素和下丘脑．垂体．甲状腺(hyp

6、othalamic．pituitary．thyroid，HPT)轴相关基因表达的影响。最后，从短期和长期毒性效应角度，我们比较了NPX96h和60d暴露后，21．d斑马鱼幼鱼在代谢系统、甲状腺系统和生物富集的差异。主要研究结果如下：(1)丁草胺暴露能显著降低斑马鱼胚胎的孵化率和存活率，并导致一系列畸形现象，包括卵黄囊水肿、心胞囊水肿和脊柱弯曲等，诱导卵黄原蛋白基因Vtgl和天性免疫相关基因IL．1∥，CC．chem和TIL．8表达的显著上调。ACT对斑马鱼胚胎的发育过程存在对映体选择性毒性，影响HPT轴相关基因TRa，TI妒，Di02和TS耶的表达，且(+)．S-ACTLh(．)．R

7、．ACT显示出更强的甲状腺干扰效应；然而，对先天性免疫相关基因IL．1fl，CC．chem，CXCL．Clc和IL．8表达的影响则表现为(．)．R．ACT作用强于(+)．S-ACT。以上结果表明，酰胺类除草剂导致的对鱼类的内分泌干扰与免疫毒性有一定的相关性，且存在对映体选择性效应。(2)在吸收阶段，斑马鱼幼鱼体内SPs的浓度迅速增加，且吸收曲线呈线性关系(R2>O．85)，生物富集因子介于140．5至586．7；在消除阶段，鱼体内SPs的浓度下降较慢，且符合一级动力学，消除速率常数(尼)介于0．018h。至0．0533h-1，半衰期(fJ／2)介于13．0h至38．5h。同时观察到P

8、M存在非对映体选择性的吸收与消除。PM和2-CH导致斑马鱼体重显著下降，三种SPs导致与甲状腺激素转运、合成、代谢相关基因的表达量发生上调或者下调，T3增加，PM和2-CH导致T4增加，BF导致T4减少，但T3／T4比值均增加。SPs会在斑马鱼体内富集且存在浓度依赖关系。上述结果表明，SPs在斑马鱼幼鱼体内存在显著的生物富集效应，且有明显的甲状腺干扰效应。(3)NPX短期暴露(96h)诱导代谢相关基因CYPlA，CYP2J26和甲状腺受体基因TRs的表达显