向日葵srap分子标记遗传连锁图谱的构建

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1、内蒙古农业大学研究生学位论文独创声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。论文作者签名：孟篓!!毽日期：翌!笙!：仝内蒙古农业大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解内蒙古农业大学有关保护知识产权的规定，即：研究生

2、在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属内蒙古农业大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为内蒙古农业大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为内蒙古农业大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，。采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：童至!量指导教师签名：2丞逝日期：型笙：笸：呈摘要JIIIIIIIIIUlUIllUlY2600788本文选用内蒙古自治区农牧业科学院提供的抗旱性差异显著的自选自交系K5

3、5、K58为亲本，获得了187个F5RILs群体，利用SRAP分子标记技术构建了一张向日葵遗传连锁图谱，为向日葵数量性状定位(QTL)、基因克隆、分子标记辅助育种等研究奠定了基础。主要研究结果如下：(1)利用两个白选自交系K55、K58为亲本，杂交获得Fl代，Fl代自交获得F2代，再采用单粒传的方法到F5代，获得了187个F5RILs群体。(2)采用单因素试验法，对M92+、dNTPs、引物浓度、TaqDNA聚合酶、模板DNA分别设置5～7个水平梯度，筛选出适宜的用量范围，以此为基础，再通过L16(4’)正交试验设计，建立了油葵SRA

4、P．PCR的最佳反应体系：20此体系中含10xBuffer2gL，M92+2．75mmol／L，dNTPs0．18mmol／L，TaqDNA聚合酶1．25U，正反引物各0．3gmol／L，模板DNA60ng，最佳退火温度为52．2℃。(3)随机选取18个正向引物，与18个反向引物组成324对引物组合。用两个亲本K55、K58对324对SRAP引物组合进行筛选，共筛选出多态性好的引物63对，63对引物共扩增出多态性位点232个，平均每对引物组合扩增出3．68个多态性位点，集中在100～1500bp之间。(4)对扩增出的232个多态性位点

5、进行卡方检验，共有34个标记出现了偏分离，偏分离比例为14．66％，其中偏向亲本K55的标记有22个，占所有偏分离位点的64．7％，偏向亲本K58的标记有12个，占所有偏分离位点的35．3％。(5)利用JoinMap4．0构建向日葵的遗传连锁图谱，构建出的图谱共有182个标记进入17个连锁群，连锁群包括标记4-31个，连锁群长度范围为47．9-252．3cM。遗传图谱覆盖基因组总长度为2012．5cM，平均标记间距为13．44cM。每个连锁群的平均标记间距5．16～24．02cM，最大的标记间距为42．8cM，最小的标记间距为O．1c

6、M，在LG4连锁群上存在一个偏分离热点区域。关键词：向日葵；遗传连锁图谱；SRAP分子标记ConstructionofSRAPMolecularMarkerGeneticLinkageMapinSunflowerAbstract．Inthispaper,ageneticlinkagemapofsunflowerwasconstructedbyusingSRAPmolecularmarkertechnology,basedontheF5RILspopulationwith187plantsdedvedfromcrossofK55×K58

7、whichhavesignificantdifferenceindroughtresistancethatprovidedbyInnerMongoliaAcademyofAgricultureandAnimalHusbandry．ThismapmaylaythefoundationforsunflowerQTLs(QTL)，genecloning，molecularmarker-assistedbreedingandotherresearch．Themainresultsofthestudywereasfollows：(1)Using

8、twooptionalinbredlinesK55，K58asparents，itcrossedFlgeneration,FlselfinggetF2，finallyobtainaFsRILspopulationswhi