中国沿海三疣梭子蟹群体形态、生化与分子遗传多样性研究

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1、学校代码：10264研究生学号：D080101002上海海洋大学博士学位论文中国沿海三疣梭子蟹群体形态、生化题目：与分子遗传多样性研究TheStudyonMorphology,Biochemistry,MolecularPhylogeographyandGenetic英文题目：DiversityoftheSwimmingCrabPortunustrituberculatusalongChinaCoast专业：水产养殖研究方向：水产动物遗传育种姓名：董志国指导教师：孙效文研究员二O一二年四月上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的

2、指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：2012年6月5日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位

3、论文属于不保密■学位论文作者签名：指导教师签名：日期：2012年6月5日2012年6月5日上海海洋大学博士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注严云勤东北农业大学教授孙仲武东北林业大学教授滕春波东北林业大学教授中国水产科学研究院梁立群研究员黑龙江水产研究所中国水产科学研究院张晓锋副研究员黑龙江水产研究所答辩地点黑龙江水产研究所答辩日期2012.5.25上海海洋大学博士学位论文中国沿海三疣梭子蟹群体形态、生化与分子遗传多样性研究摘要本研究在表型水平上应用多元分析（聚类分析、主成分分析、判别分析）对中国沿海三疣梭子蟹群体的形态学、脂肪酸与微量元素进行了比较研究，并在群体遗传水平上应用多种分

4、子标记技术（ITS、D-Loop、AFLP、SSR）对其群体的遗传多样性和遗传分化进行了系统研究，以期为三疣梭子蟹种质资源合理开发利用提供基础性数据和参考。具体内容如下：（1）运用三种多元分析方法，即聚类分析、主成分分析和判别分析，通过测量三疣梭子蟹23个形态学性状参数，对中国海大连海区、东营海区、连云港海区、舟山海区和湛江海区5个种群三疣梭子蟹的形态差异进行了比较研究。聚类分析结果表明，连云港种群和东营种群形态最为相似（形态距离0.07），大连种群与东营种群、大连种群与舟山种群的趋异程度逐渐增加，形态距离分别为0.08和0.09，而湛江种群的趋异程度最大，与其余4种群的形态距离达0.15以上

5、。主成分分析构建了3个主成分，其贡献率：主成分1为27.39%，主成分2为15.23%，主成分3为10.27%，累积贡献率为52.89%。在第1主成分中，比例性状ICM/CL、BCW/CL、PWC/CL和SW/CL的影响比较大。判别分析结果表明，5个海区种群之间的形态差异极显著（P<0.01），通过建立5个地理种群的判别函数，结果判别准确率P1为63.64%～94.44%，P2为67.74%～92.86%，综合判别率为82.24%，因此，该判别方程具有较高的判别效果。（2）为探明分布于中国四大海区的天然三疣梭子蟹群体脂肪酸组成状况及群体差异，并建立群体判定的指纹标记以应用于种质鉴定和资源保护。

6、本文应用脂肪酸指纹标记结合多元分析方法在表型水平上研究中国四大海区中湛江、大连、连云港、东营、舟山和漳州海区6个天然种群三疣梭子蟹的脂肪酸差异和系统发生关系，并建立了群体判定的脂肪酸指纹标记。结果表明，四大海区6种群体三疣梭子蟹脂肪酸存在显著差异（P<0.01），均含有27种脂肪酸。其中，反式油酸、棕榈酸、DHA、EPA和芥酸这5种脂肪酸的总含量在6群体中均高达82%以上。油酸、二十碳一烯酸、芥酸、ARA和EPA这5种脂肪酸作为脂肪酸指纹标记可以有效的对中国四大海区的6群体三疣梭子蟹进行种质鉴定，其综合判别准确率达i上海海洋大学博士学位论文88.46%。应用所含的27种脂肪酸进行聚类分析显示四

7、大海区6种群三疣梭子蟹系统聚类结果与地理距离不具有显著相关性，这种脂肪酸组成的群体差异可能与遗传和栖息地食物组成差异有关。本研究结果对于中国海三疣梭子蟹的种质鉴定和原产地资源保护具有重要的应用价值。（3）运用聚类分析、主成分分析和判别分析，通过CAP6300等离子体测定三疣梭子蟹背甲11种微量元素含量参数，对中国海大连海区、东营海区、连云港海区、漳州海区4个种群三疣梭子蟹背甲的微量元素差异进行了比