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时间:2019-02-16
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1、武汉科技大学硕士学位论文TGF--β3和MMP--11在大鼠模型子宫肌瘤中的表达及意义姓名:陈红菊申请学位级别:硕士专业:流行病与卫生统计学指导教师:尹伶20120525武汉科技大学硕士学位论文第1页TGF.p3和MMP-11在大鼠模型子宫肌瘤中的表达及意义摘要目的:建立子宫肌瘤大鼠模型,为药物筛选和发病机制研究提供动物模型;通过检测转化生长因子p3(Trallsfominggrowch£犯torbeta3,TGF-p3)和基质金属蛋白酶11(Matrixmetalloproteinases11,MMP.11)在模型子宫
2、肌瘤中的表达,来探讨TGF.p3和MMP.11与子宫肌瘤发生的相关性。方法:1.建立动物模型采取随机数字表法将20只清洁级未孕雌性SD大鼠(体重180士209)随机分成对照组和模型组,每组10只。对照组肌肉注射生理盐水O.1ml/只,隔日1次,连续9周。模型组采用雌孕激素负荷法,即先肌肉注射苯甲酸雌二醇0.1ml/只,隔日1次,连续4周,再加注黄体酮0.1ml/只,隔日1次,连续5周。每周定期称量体重并记录。2.9周后,所有大鼠禁食不禁水24小时,用2%戊巴比妥钠(40mg瓜g)腹腔注射麻醉。解剖分离大鼠子宫,使之离体,
3、肉眼观察大鼠子宫大体形态后拍照,称重,计算子宫系数(子宫重量/体重)。3.取一部分对照组子宫组织和模型组子宫组织置于.80℃存放用于提取RNA,其余部分置于4%多聚甲醛液中固定,石蜡包埋,切片,HE染色后镜下观察大鼠子宫平滑肌病理改变。4.运用R1、-PCR和免疫组织化学方法检测TGF.D3和MMP.11在对照组和模型组子宫组织中mRNA水平和蛋白水平的表达差异。结果:1.模型组子宫重量(1.980士0.420)、子宫系数(0.826士O.150)均比对照组子宫重量(0.696士0.150)、子宫系数(0.312士0.0
4、60)显著性增大,差异具有统计学意义(尸<0.05)。2.模型组大鼠子宫体积较对照组大鼠子宫明显增大、变形,肉眼可见肿胀、结节。HE染色结果也显示,模型组大鼠子宫肌层明显增厚,平滑肌排列紊乱,呈瘤样改变。3.免疫组化结果显示模型组TGF.p3的表达量((13.659士1.341)×104)和MMP.1l的表达量((14.621士0.647)×104)明显大于对照组TGF.D3的表达量((3.841士0.821)×104)和MMP.11的表达量((3.78l士O.619)×104),差异具有统计学意义(P<0.05)。4.
5、RT-PCR结果显示TGF.D3和Mm.11在模型组大鼠子宫组织的mImA水平的表达量明显高于对照组大鼠子宫组织,与免疫组化染色结果一致。结论:第1工页武汉科技大学硕士学位论文1.大鼠肌肉注射苯甲酸雌二醇和黄体酮,可建立子宫肌瘤动物模型。2.TGF.B3和MMP.11在模型组大鼠子宫组织中的高表达,提示TGF-p3和MMP-1l与子宫肌瘤发生有着密切的联系。关键词:子宫肌瘤;雌孕激素;动物模型;TGF.B3;MMP-11武汉科技大学硕士学位论文第1II页TheexpressionandsignincanceofTGF.B
6、3andMMP.11intheratlneexpresslOnandslgnitlcanceOf’l’G里’-B,andTⅥIⅥP.1】intheratObjective:mOdelofuterineleiomyOmaAbstractToestablishallappropriatemodelofuterineleiomyomafordmgdevelopmenta11dpathogenesisresearch;toinVestigatetherelationsllipbe“veenTGF.D3,MMP.1landmeUt
7、erineleiomyomamrou曲theeXpressionofTGF.p3atldMMP.11int11eratmodelofuterineleiomyoma.Methods:1.20u11pregn趾t诧maleSDrats、Vereralldomlydividedinto饥D铲oups:thecontrolgroupa11dthemodelgroup.Thecomolgroup、vastreated沥lhphysiologicalsaline0.1m∥dosebymuscleeVeryotherdayforni
8、neweeksalldmemodeI伊oupwastreatedbyes昀genandprogesteroneloadmethod.Thatistosay,丘rStlyes觚di01benzoatewcrcinjectedbymuscleevervotherdayforfourweeksand也enprogester
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