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时间:2019-02-16
《hccr在肝细胞癌变过程中的作用及其分子机制研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、AthesissubmittedtoZhenforthedegreeofTheroleandMechanismofHCCRintheprogressionofLiverCellcancerationByHongfeiZhangSupervisor:Prof.KaijuanWangDepartmentofEpidemiologyandBiostatisticsCollegeofPublicHealthJun20l2ZUl:z原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任
2、何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者:日期:年月日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论
3、文或成果时,第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者:日期:年月日摘要原发性肝细胞癌(hepatoceilularcarcinoma,HCC)是中国最常见的恶性肿瘤之一,其预后极差,发病机制尚不明确,对肝癌发生的分子机制研究一直为学者们探索的热点问题。人宫颈癌基因(Humancervicalcanceroncogene,HCCR)在正常人血清中不能被检测,在肝细胞癌和肝硬化患者血清中可以被检测,而且其对肝癌尤其是早期肝癌诊断的特异性和敏感性均高于AFP。这提示HCCR癌基因可能在肝细胞癌的病变早期就开始起作用,促进肝细胞癌
4、的发生和发展。本研究的主要内容为HCCR分子在肝细胞癌发生中的作用及其机制研究。目的研究HCCR分子表达在肝细胞癌变中的作用,并研究其发挥作用的分子机制。’方法1.HCCR与肝细胞癌发生相关性的研究:构建HCCR启动子区报告基因表达载体,应用双荧光素酶报告基因检测的方法比较不同恶性程度的肝‘癌)细胞系QSG7701细胞、Huh7细胞和HepG2细胞中HCCR启动子的相对活性:应用Westemblot方法分别检测人和小鼠从正常到肝癌发展不同阶段肝组织,中的HCCR蛋白的表达水平差异:2.HCCR在肝细胞癌发生中的作用研究:构建稳定转染HCCR的H却G2细
5、胞系和QSG7701细胞系,显微镜下观察稳定转染HCCR后HepG2细胞的形态学改变:MTT方法检测稳定转染HCCR的HepG2细胞系和QSG7701细胞系的细胞增殖能力的改变。3.HCCR表达对肝癌影响的分子机制研究:分析HCCR对E.钙粘素(CDHl:E.Cadherin)的影响和分子机制。构建CDHI启动子的报告基因载体,并通过分别在人胚肾细胞293A和肝细胞QSG7701中过表达HCCR检测其启动子活性的改变,以确定HCCR是否影响CDH!分子的启动子活性.通过构建重组表达HCCR的腺病毒载体来过表达HCCR,并用重组腺病毒感染293A细胞和Q
6、SG7701细胞,通过实时定量PCR方法研究HCCR对CDHlmRNA的影响。3.HCCR可以在293A细胞和QSG7701细胞中抑制CDHl分子的启动子活性。4.成功构建了重组表达HCCR的腺病毒载体,并通过其感染293A细胞和QSG7701细胞验证了HCCR可以在mRNA水平上负调控CDHl分子的表达。关键词人宫颈癌基因肝细胞癌细胞增殖E.钙粘素腺病毒HAbstractAbstractPrimaryhepatocellularcarcinomaisoneofthemostcommonmalignanttumorsinChina.Itsprognos
7、isisverypoorandpathogenesisisnotclear.Therefore,theresearchonthemolecularmechanisminvolvedintheoccuranceofhepatocellularcarcinomaiSthehotissueforscholarstoexplore.Thehumancervicalcanceroncogene(HCCR)isnotexpressedinnormalhumanserum,contrarily,highlyexpressedintheseraofcirrhosisa
8、ndhepatoceilularcarcinomapatients.Moreoveritssp
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