川续断皂苷ⅵ诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化的研究

《川续断皂苷ⅵ诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、·222·中国药理学通报ChinesePharmacologicalBulletin2012Feb;28(2):222～6网络出版时间:2012－2－89:53网络出版地址:http://www．cnki．net/kcms/detail/34．1086．R．20120208．0953．019．html川续断皂苷Ⅵ诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化的研究1231114武密山，赵素芝，任立中，王茹，白霞，韩红伟，李彬(1．河北医科大学中医学院方剂学教研室，河北石家庄050091;2．石家庄市桥东区医院，河北石家庄050041;3．河北医科大学第一医院骨科，河北石家庄050031;4

2、．河北医科大学生物化学教研室，河北石家庄050017)doi:10．3969/j．issn．1001－1978．2012．02．017MSF)，又因其来自骨髓基质而称为骨髓基质细胞文献标识码:A文章编号:1001－1978(2012)02－0222－05(bonemarrowstromalcells，BMSCs)。近年来因其在中国图书分类号:R-332;R284．1;R329．24不同诱导条件下，具有向中胚层组织细胞，如成骨细摘要:目的探讨川续断皂苷Ⅵ(akebiasaponinD)对大鼠骨胞、成软骨细胞、脂肪细胞等分化的能力，又称其为髓间充质干细胞(MSCs)定向诱导分化为成骨细胞的

3、影响。间充质干细胞、间充质祖细胞(mesenchymalprogeni-方法用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓torcells，MPC)或骨源性干细胞(osteogenicstemMSCs，选择合适的培养基，传代扩增。采用不同浓度的川续［2］cells，OSC)。骨组织由细胞和骨基质组成，各种断皂苷Ⅵ对大鼠MSCs定向诱导分化，MTT法观察各组对病因造成的骨质疏松症(osteoporosis，OP)都表现为MSCs的增殖作用并绘制细胞生长曲线;观察MSCs诱导分破骨细胞(osteoclast，OC)溶解基质形成骨洞的作用化过程中成骨细胞内碱性磷酸酶(alkaliphospha

4、tase，ALP)活性;采用ELISA法检测MSCs诱导分化过程中骨钙素(Osteo-超过成骨细胞(osteoblast，OB)形成基质填充骨洞的calcin，OC)的含量;RT-PCR方法检测MSCs诱导分化过程中作用。前期研究表明，由川续断组成的补肾复方在［3－5］核心结合因子α-1(Cbfα1)mRNA表达。结果细胞生长曲抑制骨量丢失，改善骨密度方面有明显疗效，体线显示各组MSCs数量均随时间延长而增加，中、高浓度的外实验也证实续断可通过促进成骨细胞增殖、分化，川续断皂苷Ⅵ能明显提高MSCs分化为成骨细胞的ALP活提高成骨细胞的活性和数量，促进基质钙化、骨痂生性和骨钙素的含量，且

5、使Cbfα1mRNA的表达升高。结论长等途径防治骨质疏松、促进骨折愈合［6］。2010年川续断皂苷Ⅵ具有促进大鼠体外MSCs向成骨细胞增殖和《中国药典》指定川续断皂苷Ⅵ(akebiasaponinD，分化的作用，这一作用可能与其升高Cbfα1mRNA的表达有ASD)为川续断科植物川续断DipsacusasperWall．关。exHenry的含量测定标准，目前国内外ASD对成骨细胞核心结合因子α-1(Cbfα1)mRNA表达影响的关键词:川续断皂苷Ⅵ;骨髓间充质干细胞;成骨细胞;细胞研究较少。深入开展ASD诱导大鼠骨髓间充质干增殖;细胞分化;碱性磷酸酶;核心结合因子α-1细胞分化为成骨细

6、胞的研究，对于研究川续断抗骨质疏松的作用机制具有重要意义。骨髓间充质干细胞(mesonchymalstemcells，［1］1材料和方法MSCs)是理想的组织工程种子细胞。骨髓组织除1．1材料含有造血干细胞外，还含有MSCs，早期分离培养时，1．1．1主要试剂、药物与动物噻唑蓝、碱性磷酸发现其形状呈成纤维细胞样而称为成纤维细胞集落酶(ALP)试剂盒(日本Wako公司)，胰蛋白酶(Sig-形成单位(colony-formingunit-fibroblastic，CFU-F)，maUSA)，CollagenasetypeⅡ(Worthington，USA)，或骨髓基质成纤维细胞(marro

7、wstromalfibroblastic，DMEM培养基(Gibco公司)，α-minimalessentialme-收稿日期:2011－10－12，修回日期:2011－11－12dium(α-MEM，Gibco，USA)，胎牛血清(Hyclone公基金项目:国家自然科学基金资助项目(No81073074，30472200);河司)，考马斯亮蓝购自上海生物工程技术服务有限北省引进留学人员经费资助项目(No200828)公司。川续断皂苷Ⅵ(ake