海桐皮抗肿瘤有效部位制备工艺及质量的研究

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1、独创性声明V868552本人声明斫呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得北京中医药大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。签名：里艳豳——日期：塑堕i：丝关于论文使用授权的说明本人完全了解北京中医药大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，也可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。(

2、保密的论文在解密后应遵守此规定)签名：里垫垫导师签名：立血日期：凼：』．旷中文摘要海桐皮抗肿瘤有效部位制备工艺及质量研究(中文摘要)硕士生：里艳茹导师：高增平副教授(北京中医药大学中药学院，北京100102)摘要：本论文分为三部分：第一部分文献综述对用作海桐皮的不同植物来源的品种、化学成分、药理活性研究现状进行了综述。第二部分海桐皮有效部位的实验研究1．对四川产海桐皮进行了对照品研究。经过反复硅胶柱层析和制备HPLC法分离得到一个皂苷类化合物单体49．5mg，利用波谱技术(包括UV,IR．MS,1H．NMR,13C-NMR)鉴定其结构为：常春藤皂苷元．3．O．a．L．鼠李蚍喃糖

3、．(1—2)吨．L．阿拉伯吡喃糖苷，经HPLC法测定纯度为99．2％。2．建立了海桐皮有效部位的制备方法。首先优化了海桐皮有效部位的提取工艺，以总皂苷含量为指标对提取工艺进行优化，经正交实验考察，确定最佳提取工艺为：确定最佳提取工艺为Q。％乙醇、用量为8倍量、提取2小时。继而对大孔树脂分离富集有效部位的工艺进行了筛选及优化。以总皂苷含量为指标，对树脂类型进行筛选，结果A树脂对有效部位中总皂苷吸附量大，解吸容易，有效部位的总皂苷含量高。通过对上样量与树脂体积的比、洗脱剂、层析柱径高比、上样液浓度、上样流速、洗脱流速、洗脱体积及使用寿命等参数的考察，确定最佳净化工艺为：树脂体积和上

4、样体积的最佳比例为1：3．5，上样液浓度为20mg／ml，洗脱剂为Q搦乙醇，层析柱的D几为1：5，吸附流速为lmFmin，洗脱流速为3mFmin，层析树脂至少可以重复使用8次。在优化的提取纯化工艺条件下制备了10批有效部位。3．建立了有效部位的HPLC指纹图谱检测方法。精密度实验考察结果表明：各共有峰相对保留时间的RSD在0．5—2．41％之间，峰面积比值的RSD6．28—7．78％；稳定性实验结果表明：供试品溶液在8h内稳定；重复性实验结果表明：各共有峰相对保留时间的RSD在O．15—1m7％，峰面积比值的RSD在4．02一海桐皮抗肿瘤有效部位制备工艺及质量研究5．01％。4

5、．建立了海桐皮提取物和有效部位中总皂苷的含量测定方法。采用香草醛一高氯酸比色法对海桐皮有效部位的总皂苷含量测定进行了方法学考察，并对药材提取物和10批有效部位进行了含量测定。以常春藤配基．3．O．I／,．L．鼠李吡哺糖．(1—2)．旺．L．阿拉伯吡喃糖苷为对照品，实验结果表明取样量在O．1～O．4mg之间时线性关系良好，回归方程为：y=2．0025x+0．0269，r=0．9991；加样回收率为95．06％，RSD为2．15％。精密度、重复性、稳定性实验结果也均符合要求。测定有效部位总皂苷平均含量为66．25％，RSD为2．16％，药材提取物中总皂苷的平均含量为45．24％，R

6、SD为1．00％。5．建立了海桐皮有效部位中常春藤配基．3．O．旺．L．鼠李吡喃糖．(1--．2)吨．L．阿拉伯毗喃塘苷(皂苷A)的HPLC含量测定方法，并对药材提取物和lO批有效部位进行了含量测定。实验结果表明进样量在0．5～2．5嵋之间时线性关系良好。其回归方程为：y=462．07x，r=0．9999，加样回收率为99．59％，RSD为2．30％。精密度、重复性、稳定性实验结果均符合要求。药材提取物中皂苷A的含量为4．713mg／g。有效部位中皂苷A的平均含量为O．76％，RSD为2．03％。第三部分总结与讨论。关键词：海桐皮：高效液相色谱；指纹图谱；总皂苷；含量洳定；有效

7、部位Abstract(SchoolofChinesePharmacy，BeijingUniversityofChineseMedicine，Beijing100102)Thisdissertationincludedthreeparts：summaryofrelatedliteratures；studyonthechemicalconstituentsofHaitong-pifromChengdu，establishmentthequantitativedeterminationofhedr