茯苓有效部位提取物的制备工艺、质量分析与其药效学..研究

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1、茯苓免疫调节部位的提取工艺，质量分析及药效学研究第一章茯苓的研究概况茯苓为多孔菌类植物PoriaCOCOS(Sclnv．)肋撇菌核，性味甘、淡，性平；归心、肺、肾经；具有健脾、安神、利水、渗湿等功效。用于脾虚食少、水肿尿少等的治疗Ⅲ。现代药理学研究表明茯苓具有抑制肿瘤生长、增强机体免疫等多方面的药理作用旺1；其主要含有的成分为三萜类和多糖D1。近些年来，许多人对三萜、多糖提取工艺、含量测定和药理学等方面作了较多较细致的研究，并且取得了较大的进展。l提取工艺方面研究1．1三萜的提取工艺研究I．1．1

2、超临界流体萃取法(SFE)超临界CO：(SFE-CO：)萃取技术具有安全，无毒、操作比较简单易掌握、成本低、萃取速度快，萃取效率比较高，能够避免萃取物在高温下的热分解，最大程度地保护所得萃取物质的活性等特点；此外，SFE-CO：流体只对溶剂中的溶质起作用，不会破坏其它的成分，用SFE-CO：技术萃取后所剩下的药渣还能再被利用，能够有效的保护环境，SFE-CO：是现在能够用于大规模生产的比较先进的分离萃取技术。章慧等¨1以灵芝三萜的萃取率为考察指标，通过单因素实验和正交试验法对SFE-CO：萃取技术

3、的工艺条件和工艺参数进行优化，确定最佳工艺条件为：压力35Mpa、温度40℃、时间2．5h、CO：流量359／min、夹带剂：物料比6：1(ml：g)。与醇提法相比，SFE-CO：法萃取灵芝子实体三萜的萃取率相对比较低，但是其萃取物中三萜的含量比较高，并且SFE-CO：萃取物中所得三萜的种类要比醇提物的种类多，SFE-CO：萃取法能够相对更全的提取三萜类的各种成分。崔星明等b1采用超临界CO：(SFE—Co：)萃取技术萃取得到的芦笋提取物，有机溶剂溶解制样，用液一质联用分析检测得到56个成分。发现

4、这些组分当中有和熊果酸保留时间基本一致的峰。从质谱上所得的峰也是和熊果酸一样的。陆慧等№1用SFE-CO：萃取白花蛇舌湖北中医药大学2012届硕士学位论文草中三萜类成分，并用正交设计优选其最佳工艺。同时通过比较所含齐墩果酸量、固形物量、总三萜量，并结合MTT实验，将SFE-CO：萃取工艺与乙醇回流提取工艺进行比较并进行综合评价，最终决定采用SFE-CO：萃取工艺，其优点是有机溶剂使用量及提取时间明显缩短，工艺简单易操作等特点，更加符合现代工业化生产要求。1．1．2化学衍生法化学衍生法(chemic

5、alderivatizationmethod)是将要分析的化合物通过化学反应转化为另一种化合物的方法。衍生法的目的就是通过衍生化反应使那些不能直接进样用HPLC分析的物质能够更方便的用色谱进行分析，对分离确定该化合物的结构提供了便利。仲兆金等n1用二苯重氮甲烷的化学衍生法，将结构相近不容易分离的三萜酸酯化，分离后再部分水解，最后分离得到3种茯苓三萜类化合物，用核磁分析并确定了其结构。这种分离方法的优点就是不需要高端仪器，简单易操作，条件比较温和、安全。1．1．3超声波法超声波具有空化作用，造成局部

6、出现高温、高压，从而加快了物质体系的传质和传热速度；在萃取过程中，这种冲击作用能够促使溶剂和水相互混合，加速溶质扩散，同时还可以破坏植物组织中的细胞壁，促进其它的物质溶解出来，提高了在植物中的萃取效率。邓迎娜等哺1运用超声提取方法与乙醇回流提取相比，它能够提高总三萜的提取率，缩短提取时间，并且避免因为高温而破坏总三萜的成分。优选了超声频率为42千赫兹下最佳的超声提取参数。最后得到泽泻中三萜类总成分最大提取率为1．9％左右。黄书铭等n1通过常规方法提取和超声循环提取实验对比，结果表明，在高效液相色谱

7、中，常规方法和超声提取所得的产物的保留时间相差不大，峰形也基本一致，这说明两种提取方法所得产物基本上是一致的．此外，通过超声分离得到的灵芝三萜类化合物，通过药理实验发现其中大部分化合物能够保持活性。同时通过提取率比较发现，超声循环所用的有机溶剂与常规方法相比，用量显著减少，浸提时间也大大缩短，且目标产物的提取率与常规方法相比也提高很多。这种提取茯苓免疫调节部位的提取s-E，质量分析及药效学研究技术不仅很大程度的降低了提取成本，同时也大大提高了设备的利用率。1．1．4半仿生提取法这种方法是从生物药剂

8、学方面，结合分子药物学和整体药物研究的方法，模拟口服给药的环境，用一定pH值的酸水和碱水来提取药物，得到较高活性的化合物，这种新的提取工艺可以适用于经消化道途径给药的中药制剂。如分别用“半仿生提取法竹和常规法制得的芍甘止痛颗粒剂，并进行抗巴豆油致耳廓炎症和抑制离体兔肠平滑肌的药效学实验，发现“半仿生提取法"制得的颗粒效果更佳显著。“半仿生提取法"不像乙醇沉淀去掉杂质那样，它可以更加全面的保护有效物质，减短生产的周期、降低生产的成本等优点n们。龚慕辛等n¨分别用不同浓度的乙醇、水、碱