资源描述：
《红曲霉红曲生理活性物质的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、红曲霉红曲生理活性物质的研究河南省科学院生物研究所/刘徳海安明理王红云河南省饲料产品质量监督检验站/陈小鸽原刊于《新饲料》杂志2007年第4期刘德海：河南省科学院生物研究所副研究员，兼河南省瑞特利生物技术冇限公司技术总监，河南省生物工程学会副主任委员，河南省微牛物学会理事。摘要：针对红
2、川霉发酵产物红Illi屮多种生理活性成份开展研究，保存的功能性红Illi菌株monascusYS5号所产酶活力分别为:糖化酶635.Ou/g,淀粉酶102.5u/g,酸性蛋白酶310.2u/g,纤维素酶85.6u/g,果胶酶67.2u/g；洛伐他汀含量为0.105mg/g
3、。关键词:红曲霉;红曲；活性红曲霉(Monascus)其发酵产物红曲古代称丹曲,起源于中国,是传统中药,李时珍在《本草纲目》谷部记载：“红曲，廿、温、无毒，主治消食活血，健脾燥胃，治赤白痢下水谷”。“红曲具冇健脾胃、消食、活血行气Z功效”。现代研究表明，红曲中含有降血清胆.固醇作用显著的洛伐他汀(monacolinK)等多种生理活性物质，具有降血脂、降血压、抗疲劳、増强免疫力等广泛的药理作用，且无毒副作川，已引起国内外研究者的极人关注。在畜牧养殖上，宋宇轩等(2002)报道，采用红
4、11
5、,金银花等屮草药组成的复方制剂添加于蛋鸡日粮屮观察対鸡蛋胆固醇影响
6、，结果表明，蛋黄中胆］古【醇的浓度I、II组比对照组分别降低25.4%(p<0.01)和17.4%(p<0.05),I、II组极显著降低了蛋鸡血浆总胆固醇含量(p<0.01)o赵伟(1998)报道,洛伐他汀能使血清和蛋黄中胆固醇浓度降低25%和20%,对产蛋量与蛋重无明显影响。刘來亭等(2000)在32周龄海蓝白商品蛋鸡日粮中添加0.00675%的洛伐他汀，结果降低了蛋黄中胆固醇的浓度8%,全蛋屮胆固醇的含量降低10%,口提高了产蛋率。DavidH等使用屮国的红Illi等做临床试验，发现红曲冇较好的降胆固醇作用，并未发现负面影响。屮药红曲等冇效活性成分降
7、低血清胆固醇，以促进生长，增强机体抵抗力，毒副作用低，无药物残留，不产生抗药性等特点，备受养殖者欢迎。产品满足了特殊人群保健的需耍。本文对本研究室筛选的功能性红曲菌株的培养特征及生理活性物质进行了分析研究，以便于生产及养殖上应川。1.材料与方法1.1菌株红曲霉菌株MonascusYS5号，实验室筛选并保存。1.2培养基斜面保藏培养基：6〜8%米III］汁，可溶性淀粉2%,蛋白腺1%,琼脂2%,冰醋酸少许。液体种子培养基：玉米粉1%,葡萄糖2%,蛋白豚1%,KH2P040・25%,MgS040.05%,PH5.0。固体发酵培养基：大米于室温下浸泡2h,加入
8、KH2P040.25%,MgS04・7H200.05%,NaNO30.15%,水适量,pH自然。分装于500ml三角瓶中,60g/瓶。以上培养基，均需0.IMpa压力下，灭菌30min备用。接种后，30°C培养10d。1.3试剂与仪器1.3.1试剂洛伐他汀，标准品购自屮国药品牛物制品检定所。其余药品及试剂均为国产，分析纯。1.3.2仪器721型可见分光光度计；751型紫外分光光度计；恒温水浴锅。光电显微镜；超净工作台，髙压灭菌锅，电子天平，恒温摇床，恒温培养箱，电炉，电热鼓风干燥箱等。1.4分析测定方法1.4.1酶系测定1.1粗酶液制备发酵成熟红曲米，经
9、40°C恒温烘干后，准确称取样品1.000g,以少量缓冲溶液5ml溶解，加40°C温水95ml,40°C浸提，浸提6h,以脱脂棉过滤备用。1.4.1.2糖化酶活力的测定测定方法为在50ml比色管屮，加入2%nJ"溶性淀粉溶液25.0ml及乙酸缓冲液5.0ml,置40°C恒温水浴中预热5min,然后加入待测酶液2.0ml,摇匀，准确保温30min,立刻加入20%氢氧化钠溶液0.2ml,冷却后吸取5ml置于碘量瓶中,准确加入0.lml/1碘溶液10.0ml,0.lmol/1氢氧化钠溶液15ml,暗处反应15min,取出加2mol/l硫酸溶液2.0ml,用硫代
10、硫酸钠标准溶液滴定测定酚活力。酚活力定义：lg固休酚粉，于40°C、PH为16条件下lh分解町溶性淀粉产生lmg葡萄糖,即为1个醮活力单位，以u/g表示。1.3Q-淀粉嗨活力的测定测定方法为：在50ml比色管中，加入2%可溶性淀粉20.0ml及磷酸缓冲液5.0ml,于60"C恒温水浴中预热5min,然后加入待测酚液1.0ml,摇匀，准确反应5min,取出，吸取该反应液1.0ml于稀碘液5.0ml中,用分光光度计660nm波长下测定其0D值，测定酶活力。酶活力定义：lg固体酶粉，于60°C、PH为6.0条件下lh液化lg可溶性淀粉，即为1个晦活力单位，以u
11、/g表示。1.4.1.4蛋门酶活力的测定采用福林法：测定方法是在15mmx100
