at-ra抑制大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化

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1、at-RA抑制大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化张蔓,舒秀兰,李文迪,刘晶晶,陈洁,刘友学(400014重庆,重庆医科大学附属儿童医院儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室,儿科学重庆市重点实验室,重庆市(儿童发育重大疾病诊治与预防)国际科技合作基地)[摘要]目的探讨高浓度全反式视黄酸(all-transretinoicacid,at-RA)抑制大鼠骨髓间充质干细胞(ratbonemarrowmesenchymalstemcells,rBMSCs)向脂肪细胞分化的机制。方法体外分离、培养和诱导rBMSCs;在成脂诱导液中加入0.1、

2、0.5、1.0、5.0mol/L不同浓度(0.1~5.0mol/L)的at-RA,光学显微镜下观察细胞形态及油红O染色变化;油红O染色提取法分析不同浓度at-RA对BMSCs成脂分化的影响;real-timePCR测定细胞视黄酸受体(RAR、RAR)、CCAAT增强子结合蛋白(CEBP)及过氧化物酶体增殖激活受体2(PPAR2)mRNA水平的变化。结果细胞形态及油红O染色观察发现,在0.1、0.5、1.0、5.00.1~5.0mol/Lat-RA作用下rBMSCs向脂肪细胞分化受到抑制,且呈浓度依赖性;油红O染

3、色提取法半定量测定结果显示,随着at-RA浓度升高,分化细胞内脂肪含量也随着降低(P<0.01);real-timePCR检测显示与血清组(未加at-RA)相比,加入at-RA后,rBMSCs的CEBP和PPAR2表达显著降低(P<0.05),RAR表达无显著差异,但RAR表达显著增加(P<0.01)。结论0.1、0.5、1.0、5.00.1~5.0mol/Lat-RA可抑制rBMSCs向脂肪细胞分化,其机制可能与RAR的上调及CEBP、PPAR2的下调有关。[关键词]全反式视黄酸;骨髓间充质干细胞;成脂分化;视

4、黄酸受体[中图法分类号][文献标志码]Aat-RAinhibitsitsadipogenicdifferentiationofratbonemarrowmesenchymalstemcellsZhangMan,ShuXiulan,LiWendi,LiuJingjing,ChenJie,LiuYouxue(MinistryofEducationKeyLaboratoryofChildDevelopmentandDisorders,KeyLaboratoryofPediatricsinChongqing,ChongqingInter

5、nationalScienceandTechnologyCooperatioCenterforChildDevelopmentandDisorder,Children’sHospitalofChongqingMedicalUniversity,Chongqing,400014,China)[Abstract]ObjectiveToinvestigatethemechanismofall-transretinoicacid(at-RA)toinhibittheadipogenicdifferentiationofratbonema

6、rrowmesenchymalstemcells(rBMSCs).MethodsRatBMSCswereisolated,incubatedandinducedtodifferentiateintoadipocytes.At-RAathighconcentrations(0.15.0mol/L)wasaddedtotheadipogenicinducedmedium.ThemorphologicchangesofrBMSCsduringdifferentiationwereobservedundermicroscope.Th

7、eeffectofat-RAontheadipogenicdifferentiationwasanalyzedbyoilredOstaining.TheexpressionofretinoicacidreceptorsandRAR,RARCCAAT/enhancerbindingprotein(CEBP)andperoxisomeproliferators-activatedreceptor2PPAR2wasanalyzedbyreal-timequantitativepolymerasech

8、ainreaction(real-timePCR).ResultsAttheconcentrationof0.15.0mol/L,at-RAinhibitedrBMSCstodifferentiateintoadipocytes.Andtheeffectwa

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