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时间:2019-01-04
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1、食品安全快速检测技术发展研究食品安全问题是关系到国计民生的大事,也是我国乃至全世界的都格外关注的问题。食品安全检测技术可以有效的保障食品安全,为相关部门提供重要的技术支撑。目前,我国的农业生产仍以散户经营为主,而食品厂商大部分也属小微企业,由于大型仪器设备很难在田间地头、批发市场或者进出口岸实现快速检测,所以便携式的低成本的食品安全快速检测技术就应运而生,并且具有别样的意义。快速检测技术具有如下明显的优势:第一,检测速度快,可操作性强;第二,样品不需要预处理或者只需简单的前处理便可进行正常检测;所需检测试剂用
2、量少、成本低、无公害;第三,具有足够的灵敏度及可靠性,满足相关标准和规范的要求;第四,具有良好的选择性和特异性,可以实现对目标物的精准识别;第五,具有足够小的体积或者可实现便携,有些方法可实现自动化。近年来,随着经济技术的发展,我国食品安全快速检测技术得到了大幅发展,并取得了一定的成绩。常用食品安全快速检测技术概述目前,食品安全快速检测技术种类繁多,其中比较常用的方法主要有快速检验纸片法、免疫学技术、分子生物学检测方法等。快速检测纸片法。快速检验纸片法是基于微生物检测的原理,根据菌种不同可以分为不同类型的检验
3、纸片,如大肠杆菌、葡萄球菌等,此种快速检测方式与传统的发酵法检测方式具有很高的相关性,例如,采用大肠杆菌快速检验纸片法对餐具表面进行检测,其灵敏度和特异性与发酵法相似度极高,而且还兼具可操作性强、检测速度快,节省成本等优点。PF试纸是由美国3M公司生产的用于快读检测大肠杆菌的试纸,其中加入了显色剂和染色剂,可以明显提升检测的效果,而且还克服了热琼脂法难以实现受损细菌恢复的缺点,传统大肠杆菌检测方法给出的是MPN值,而PF试纸可以精确的给出每克待检样品中大肠菌群的数量,这是传统方法无法实现的。霉菌快读检测试纸可
4、以精确、快速的给出食品中霉菌的分布情况,其与国际法具有相似的检出率,而且菌落典型,更易进行检出和判断。纸片荧光法是基于酶-底物反应原理而形成的检测方法,是通过特定酶的检测来进行菌种及菌落数的判定的,所以只需要对大肠杆菌相关酶的活性进行检测,将荧光产物在特定波长紫外光下进行观察,即可实现对大肠杆菌的定量。免疫学技术。免疫学技术是基于抗原与抗体特异性结合反应的原理,再通过免疫放大技术对细菌进行识别的技术,其可以在增菌后不分离的状态下实现菌类的筛选。因为抗原抗体反应具有较强的特异性,所以此种技术分为很多种方法,在食
5、品安全快速检测领域主要有免疫磁珠分离法、免疫乳胶试剂法等。抗原抗体反应时间较快,所以免疫学技术具有较高的灵敏度,可以在较短的时间内完成菌体的检测,例如,免疫磁珠分离法可以将快速的将样品中存在的少量的微生物进行收集和浓缩,为下一步的研究工作提供支持。再如胶体金免疫层析技术可以制成胶体金探针,并可利用复合方式将其制成免疫层析条,可以实现对沙门氏菌的快速检测,具有良好的应用前景。分子生物学检测方法。分子生物学检测方法是基于聚合酶链式反应而形成的检测方法,也被称为PCR技术,在分子生物学领域得到了广泛的应用。PCR技
6、术主要是利用各菌种的核酸序列,设计出相应的引物,然后在对所提取出的核酸序列进行扩增,这样就可以通过特定的手段实现对扩增结果的观察,PCR技术整个过程所需消耗的时间在24小时以内。随着科学技术的进步,PCR技术也得到了很大的发展,衍化出了特异性更强、灵敏度更高的检测技术,如荧光定量PCR技术、免疫捕获PCR技术等。免疫捕获PCR技术。本技术是免疫学技术与PCR技术的有机结合,是基于抗体与抗原特异性反的应免疫学机理,首先采用特异性的抗体对样品中的病原菌进行捕获或者富集,然后在进行PCR反应,这样可以实现对目标病原
7、菌的快速检测,如0157病原菌的检测,传统检测方式需要72小时,而采用免疫捕获PCR技术可以大大缩短检测时间,只需4-5小时。荧光定量PCR技术。荧光定量PCR技术相较于传统的PCR技术,增加了一条标记2个荧光基团的探针,形成了更为完整的能量传递结构。当发生特异性PCR反应时,探针会在生物酶的作用下发生分解,荧光抑制作用就会消失,这样荧光信号就会发生变化。在PCR反应进行过程中,荧光信号就会不断的发生变化,由此可以做出关于循环数与荧光值的特征性曲线,可以对是否存在特异性PCR扩增进行判断,此外,通过与相关标准
8、的比对,还可以对体系中的模板进行定量。荧光定量PCR技术无需采用电泳,可以减少对生态环境的污染,而且还能显示出肉眼可见的荧光值,可以有效的提升检测的灵敏度。细菌直接计数法。细菌直接计数法可以分为流式细胞仪(FCM)和固相细胞计数两种方式,流式细胞仪往往采用激光作为发光源,经聚焦后的光束垂直照射在样品上,经荧光染色的细胞在光照下将会产生散射光和激发荧光,散射光的强弱可以反映细胞体积的大小,而激发荧光的
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