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时间:2018-12-23
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1、最新考纲1.微生物的分离与培养2.某种微生物数量的测定3.培养基对微生物的选择作用4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用考纲解读1.培养基的种类、营养要求及配制原则2.无菌技术的具体操作及应用3.运用相关技术解决微生物的分离与培养等实际问题知识点一 微生物的培养 议一议:高温灭菌的原理是什么? 想一想:接种过程为什么要在酒精灯的火焰旁进行? 查一查:什么是菌落?它有什么用途?知识点二 微生物的利用分解纤维素的微生物的分离——纤维素分解菌的筛选 想一想:什么叫选择培养基?看一看:纤维素分解菌筛选的原理是什么?1.培养基的配
2、制原则(1)目的要明确:配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。(2)营养要协调:注意各种营养物质的浓度和比例。(3)pH要适宜:各种微生物适宜生长的pH范围不同,如细菌为6.5~7.5,放线菌为7.5~8.5,真菌为5.0~6.0,培养不同微生物所需pH不同。2.培养基的营养构成(1)各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐;(2)不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。3.配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项(1)倒平板的适宜温度是50℃左右,温度过高会烫手,过低培养基又会凝固
3、;(2)平板需倒置,这样既可使培养基表面的水分更好地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。4.两种纯化细菌的方法的比较项目优点缺点适用范围平板划线法可以观察菌落特征,对混合菌进行分离不能计数适用于好氧菌稀释涂布平板法可以计数,可以观察菌落特征吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延适用于厌氧菌和兼性厌氧菌小贴士自我校对:①营养物质 ②生长繁殖 ③水 ④碳源 ⑤氮源 ⑥无机盐 ⑦特殊营养物质 ⑧氧气 ⑨温和 有害的微生物 ⑪芽孢 ⑫孢子 ⑬煮沸消毒法 ⑭巴氏消毒法 ⑮所有的微生物 ⑯灼烧 ⑰干热 ⑱高压蒸汽 ⑲接种环、涂布器
4、⑳平板划线 稀释涂布平板 酒精灯火焰 固体斜面 菌落 4℃ 不长 污染 甘油管藏 -20℃ 选择培养基 尿素 稀释涂布平板法 显微镜直接计数 ×M 被测试的条件 非测试因素 纤维素 CMC—Na 微生物 倒平板 发酵产纤维素酶 葡萄糖议一议:高温可以使菌体细胞内的蛋白质、核酸变性失活,从而达到灭菌的目的。想一想:因为这里是一个无菌区,可以避免杂菌污染。查一查:菌落是单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,形成的一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体。不同细菌的菌落在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面的特征不同,它可以作为鉴别菌
5、种的重要依据。想一想:选择培养基是在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。目的是培养、分离出特定微生物。看一看:刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素,从而使菌落周围形成透明圈。,微生物的培养与应用1.微生物的实验室培养(1)培养基①概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。②分类和应用划分标准培养基种类特 点用 途物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂,如琼
6、脂观察微生物的运动、分类、鉴定固体培养基微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种化学成分天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成)分类、鉴定用途选择培养基培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物(如培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入青霉素;培养金黄色葡萄球菌,可在培养基中加入高浓度食盐)鉴别培养基根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物,如可用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(
7、若有,菌落呈深紫色,并带有金属光泽)③培养基配方及营养要素基本营养要素:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。营养要素来源功能碳源无机氮源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物①构成细胞中的物质和一些代谢产物;②既是碳源又是能源有机碳源糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等氮源无机氮源无机氮:NH3、铵盐、硝酸盐、N2等将无机氮合成含氮的代谢产物有机碳源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物生长因子维生素、氨基酸、碱基①酶和核酸的组成成
8、分;②参与代谢过程中的酶促反应提醒 ①微生物最常用的碳源是糖类,尤其是葡萄糖;最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。②对异养微生物来说,含C、H、O、N的有机化合物既是碳源
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