静电纺丝phbvplacol联合星形胶质细胞移植修复大鼠脊髓损伤的研究

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1、————————————————————————————————————————————————————————————————一————————————————～塑塑奎堂堡：兰堂垡堡茎rfl文摘要'／、J_V一一静电纺丝PHBV／PLA+COL联合星形胶质细胞移植修复大鼠脊髓损伤的研究浙江大学医学院外科学(骨科学)硕士研究生景易彪导师徐侃主任中文摘要目的．t研究静电纺丝PHBV／PLA+COL联合星形胶质细胞(AC)移植对脊髓损伤大鼠神经再生和功能恢复的作用。方法：扫描电镜及免疫荧光观察AC在静电纺丝PHBV／PLA+COL膜上的生长粘附情况，逆转

2、录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测AC在材料上生长7天，14天后BLBP，GLT-1，CSPG，S100—13mRNA的基因表达变化。建立大鼠左侧T10脊髓半横断模型：32只SD大鼠随机分成4组：G1对照组，仅横切；G2AC移植组：G3PHBV／PLA+COL移植组；G4PHBV／PLA+COL联合AC移植组。术后每周采用BBB评分评价大鼠后肢运动功能恢复情况。术后8周处死大鼠，行HE染色，神经丝蛋白一200(neuroflament一200,NF一200)和胶原纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein，GFAP)的负

3、疫荧光染崔．。rI万方数据浙fI：大学硕：上学位论文巾文摘要结果：扫描电镜及荧光显微镜可见星形胶质细胞在材料上生长粘附良好；q-PCR显示PHBV／PLA+COL使AC在7天及14天后BLBP、GLT-1、S100一p的表达量明显增高。术后8周，G4组BBB评分最高，G3组BBB评分高于G1，G2。HE染色显示，G4组脊髓仅少量较小的空洞，低于其余各组，且损伤边缘的正常脊髓实质较其余各组完整，G1组可见多个较大的空腔，远大于其余3组；GFAP及NF的免疫荧光染色显示，4组损伤边界均有不同程度的胶质疤痕形成，G1及G2组最严重，G3程度较前两者轻，G4

4、组明显低于其余3组；G4组损伤边界有较多的NF一200阳性的神经纤维发出，G3组其次，而G1及G2组仅可见少量的神经纤维。结论：静电纺丝PHBV／PLA+COL支架具有良好生物相容性。植入载有AC的静电纺丝PHBV／PLA+COL支架可减轻脊髓半横断大鼠的损伤区域的炎症反应，减少脊髓空洞的形成及减轻损伤边界脊髓实质的二次伤害，减轻胶质疤痕的形成，促进神经元再生，从而促进后肢运动功能恢复。关键词静电纺丝，星形胶质细胞，脊髓损伤，神经再生万方数据浙汀大学硕士学位沦文英文摘要CombinedTreatmentofElectrospinningPHBV／PL

5、A+COLScaffoldwithAstrocyteinRatafterSCISchoolofMedicine，ZhejiangUniversitySpecialtyOrthopedicSurgeryCandidateofM．DJingYibiaoSupervisorDr．XuKanAbstractObjective：CombiningElectrospinningPHBV／PLA+COLscaflbldwithAC，tostudytheireffects，therebydeterminingthefunctiontheyplayedonneuron

6、alregenerationandrecoveryofSCIinrat．Methods：ThegrowthandadhesionofACinElectrospinningandPHBV／PLA+COLmaterialareobservedwithelectricscanningmicroscopeandimmunofluorescence，especiallyinthechangesofgeneexpressionsofBLBP，GLT-1，CSPG，S100一[3mRNAafter7and14days’inthematerials．32SDrats

7、arerandomlydividedinto4groups，namely，G1：controlledgroup，onlytransected；G2：ACtransported；G3PHBV／PLA+COLtransported；G4：combiningPHBV／PLA+COLandACtransported．TheBasso，Beattie，andBresnashan(BBB)scalesystemareusedweeklytoevaluatetheirmotorrecoveryaftersurgery,andhematoxylin—eosinsta

8、iningandneuroflament一200(NF一200)andglialfibrillaryacid