壳聚糖γ-聚谷氨酸负载溶菌酶复合纳米粒子制备及抗菌性能研究【开题报告】

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1、毕业论文开题报告高分子材料与工程壳聚糖/Y-聚谷氨酸负载溶菌酶复合纳米粒子制备及抗菌性能研一、选题的背景和意义壳聚糖（chitosan）又称口J溶性甲壳质、甲壳胺、几丁聚糖等，是曲自然界广泛存在的甲壳质经脱乙酰反应后得到，其化学名称为卜（1,4）2乙酰氨基2脱氧・D■葡聚糖,是一种线性多糖。壳聚糖作为一种带正电荷的天然多糖，其具有无毒、无刺激性、无致敏性、无致突变作用，降解产物为低分子壳寡糖和葡萄糖胺，具有良好的生物相容性和生物降解性。壳聚糖是应用广泛的新型药用辅料之一，作为药物载体可以控制药物释放、增加药物吸收、降低药物毒副作用，提高疏水性药物对细胞膜的通透性和药物的稳定性及改变给药途

2、径，还可以加强制剂的靶向给药能力。在药物载体等研究领域壳聚糖将具有广泛的应用前景。r聚谷氨酸是一种生物叮降解大分子，在生物体内能降解为谷氨酸而直接被吸收,生物相容性优良、低免疫原性、无毒副作用，这是其他材料所不可比拟的；水溶性极好,可增加药物的溶解性；主链上存在大量易修饰的竣基，可以提高载药量，也可以进行功能化修饰，形成性能更佳的衍生物；为弱阴离子型聚合人分子，能够在血液循坏中保留较长时间，对靶向给药具有重要意义。二、研究目标与主要内容（含论文提纲）壳聚糖/Y-聚谷氨酸因英具冇良好的生物学特性而成为药物载体研究的热点。药物经过壳聚糖/厂聚谷氨酸负载后，不仅能够达到缓释控释的目的，还能够改

3、变药物的给药方式，以此减少给药次数，降低药物不良反应，捉高药物生物利用度。本论文旨在研究：（1）壳聚糖/厂聚谷氨酸负载溶菌酶复合纳米粒子的可行性；（2）壳聚糖/丫-聚谷氨酸负载溶菌酶复合纳米粒子的载药量和包封率；（3）壳聚糖/丫-聚谷氨酸负载溶菌酶复合纳米粒子的药物释放率。论文提纲：1刖S1.1研究背景1・2研究方案2实验部分2.1药品与仪器2.2实验步骤2.2.1找到壳聚糖和聚谷氨酸混合不出现凝胶的最佳比例2.2.2聚谷氨酸和溶菌IW相互作用制备纳米2.2.3再包裹纳米粒子的制备方法一2.2.4再包裹纳米粒子的制备方法二2.2.5再包裹纳米粒子的制备方法三2.2.6测定载药量和包封率2

4、.2.7体外释放2.2.8红外光谱分析2.2.9热分析3结果与讨论4结论5参考文献6致谢三、拟采取的研究方法、研究手段及技术路线、实验方案等壳聚糖分了中存在氨基和轻基，它们均具有较高的反应活性。Y■聚谷氨酸分了链上具有活性较高的侧链竣基，其可能与溶菌酶的氨基发生分子间相互作用形成复合物。再把复合物溶液加入壳聚糖溶液中将复合物负载，通过滴加多聚磷酸钠（TPP）,TPP上的磷酸盐负离了和壳聚糖上的氨基正离了发生分了间或分了内交联而形成纳米粒了。通过改变溶菌酶的浓度，来研究不同溶菌酶浓度对壳聚糖/丫■聚谷氨酸纳米粒子的载药量和包封率的影响，和溶菌酶的体外释放性能，同时用DSC来分析载约和未载约

5、纳米粒了不同热转变。并对这些纳米粒了做表征测试，了解纳米粒了形成的机理。找到壳聚糖和聚谷氨酸混合不出现凝胶的最佳比例（1）将壳聚糖溶于1%的醋酸溶液配成0.5mg/ml壳聚糖酸液（A液）；（2）将聚谷氨酸溶于去离了水配成0.5mg/m1的聚谷氨酸水溶液（B液）；（3）将一定量A液与一定量B液混合，改变体积比直到制得非凝胶化溶液，记录最佳比。聚谷氨酸和溶菌酶相互作用制备纳米（1）将聚谷氨酸溶于去离子水小，室温下搅拌，配成0.5mg/mL的聚谷氨酸水溶液;（2）将溶菌酶溶于去离了水中，室温下搅拌，配成0.5mg/mL的溶菌酶水溶液；（3）取一定体积步骤（1）的溶液与一定体积步骤（2）的溶液配

6、比，至有蓝色荧光出现（C液），记录两者溶液的比例。再包??纳米粒子的制备方法一（1）将C溶液分别取2ml、4ml、5ml、10ml、20ml滴于20ml浓度为0.5mg/ml的壳聚糖溶液，并不断磁力搅扌半，观察是否仍有蓝色荧光。再包裹纳米粒子的制备方法二（1）将C溶液分别取2ml、4ml>5mR10ml>20ml滴于20ml浓度为0.5-5mg/ml的壳聚糖溶液，再滴加5ml的浓度为0.5mg/ml三聚磷酸钠水溶液，并不断磁力搅拌，看是否仍有蓝色荧光。再包裹纳米粒子的制备方法三（1）将5mg溶菌酶先溶于20ml浓度为0.5mg/ml壳聚糖，磁力搅拌充分溶解后，边搅拌边向此溶液中滴加一定体

7、积的浓度为0.5mg/inl聚谷氨酸水溶液，宜到有蓝色荧光出现。测定载药量和包封率将各方法所制备的不同的纳米溶液在15°C下超离心（50000xg）lOmin,每隔一段时间取一次样，从水溶液屮分离出纳米粒子，冷冻干燥。上层清液用紫外分光光度仪测定波长为530nm处的透光，计算游离的溶菌酶的量。纳米粒了对溶菌酶的载药量=（溶菌酶的总质量■游离溶菌酶的质量）/纳米粒了的质量xlOO%纳米粒了对溶菌iW的包封率=（溶菌酶的总质量■游离溶菌