三叶青叶指纹图谱研究及8种酚类成分含量测定

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1、三叶青叶指纹图谱研究及8种酚类成分含量测定［摘要］采用超高效液相色谱建立三叶青叶指纹图谱，并同时测定8种酚类成分(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异荭草苷、荭草苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆苷、异牡荆苷)的含量，为三叶青叶质量评价提供依据。采用UHPLC法，WelchUHPLCUltimateXB-C18色谱柱(4.6mmX150mm,2.7um)，流动相为乙腈-0.1%甲酸(含5%甲醇)水梯度洗脱，流速0.4mL?min-l,柱温30"C,采用国家药典委员会“相似度评价软件2004AB”处理分析，建立41批不同产地三叶青叶的指纹图谱

2、，共标定15个共有峰并对不同产地进行聚类分析，然后选择其屮8个主要的酚类成分作为定量指标，建立UHPLC同时测定8种主要酚类成分含量的方法，经方法学验证该研宂建立的三叶青叶指纹图谱和8种酚类成分含量测定方法简便有效、灵敏、准确，可为综合评价三叶青叶的质量提供参考。［关键词］三叶青叶；UHPLC；指纹图谱；含量测定［Abstract］Anovelmethodcombiningultra-highperformanceliquidchromatography(UHPLC)fingerprintandsimultaneousqua

3、ntitativeanalysisofeightphenoliccomponentswasdevelopedandvalidatedforqualityevaluationofTetrastigmahemsleyanumleaves.Forfingerprintanalysis,15peakswereselectedasthecommonpeakstoevaluatethesimilaritiesamong41batchesofT.hemsleyanumleavescollectedfromdifferentregions.

4、Additionally,simultaneousquantificationofeightmarkers,includingneochlorogenicacid,chlorogenicacid,cryptochlorogenicacid，isoorientin,orientin,vitexin-2-O-rhamnoside，vitexinandisovitexin,wasperformedandtheobtaineddatademonstratedthatourmethodhasachieveddesiredlineari

5、ty,precisionandaccuracy.ClusteringstatisticalanalysiswasfurtherapplicationinT.hemsleyanumleavesfromdifferentregions.Theresultsindicatedthatnewapproachconbineultra-highperformanceliquidchromatography(UIIPLC)fingerprintandsimultaneousquantitativeanalysisofeightphenol

6、iccomponentswasapplicableinqualitycontrolofT.hemsleyanumleaves.［Keywords］Tetrastigmahemsleyanumleaves;UHPLC；fingerprintanalysis；qualitycontroldoi：10.4268人jcmm20162115三r青是我国特有的珍稀药用植物，为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤TetrastigmahemsleyanumDielsetGilg,以块根或者全草入药，具有清热解毒、祛风化痰、活血止痛的功效［1］，并

7、广泛用于多种国药准字中成药，如排石利胆胶囊、华佗风痛宝、结石康胶囊等。前期课题组己经针对三叶青的块根进行了质量评价［2-4］，但由于三叶青对生长环境的要求较为苛刻，在自然条件下生长缓慢，加上近年来针对三叶青块根人为无节制的采挖，野生的三叶青已经成为濒危药用植物［5］,目前多数三叶青药材的使用多为块根部位，对三叶青叶资源的开发利用的报道较少，而现代药理研宄表明三叶青叶也具有抗炎、镇痛、解热、抗肿瘤、抗病毒、调节免疫［6-7］等作用，同时也是结石康胶囊等中成药的直接原料，因此为了加大三叶青资源的应用，本文采用UHPLC建立三叶青

8、叶指纹图谱，并同时测定8种主要酚类成分（新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异荭草苷、荭草苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆苷、异牡荆苷）的含量，为三叶青叶质量评价提供依据。1材料安捷伦LC1290超高效液相色谱仪（安捷伦公司）；CPA225D型1/10万分析天平（德国Sartorius公司）；KQ-500