ｍｍｐ－９在骨肉瘤中的表达及意义

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1、ＭＭＰ－９在骨肉瘤中的表达及意义【摘要】目的检测骨肉瘤中MMP-9的表达，探讨其在骨肉瘤发生、发展及转移中的作用。方法应用免疫组织化学技术检测46例骨肉瘤标本中MMP-9的表达。结果MMP-9在骨肉瘤组织中的表达量明显高于良性骨肿瘤组织，在有无软组织浸润及不同Ennecking分期的骨肉瘤之间比较，MMP-9表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论骨肉瘤组织中MMP-9高表达，MMP-9在骨肉瘤发展中起重要作用。　　【关键词】肿瘤；骨肉瘤；MMP-9；免疫组织化学　　　　基质金属蛋白酶-9(Matrix

2、metalloprotEinase，MMP-9)是基质金属蛋白酶家族中的重要成员，是92kDa的明胶酶B，主要由巨噬细胞、结缔组织细胞和某些肿瘤细胞合成分泌。骨肉瘤是常见的肿瘤，其发病率呈上升趋势，本试验通过免疫组化方法检测MMP-9在骨肉瘤及良性骨肿瘤中的表达情况，探讨MMP-9与骨肉瘤临床病理特征的关系。　　　　1资料与方法　　　　1.1材料收集我院骨肉瘤手术治疗后经病理确诊的病例46例，年龄为11-45岁，其中男25例，女21例，术前均未进行任何治疗，同时选取12例良性骨肿瘤作为对照(骨样骨瘤6例，骨母细

3、胞瘤6例)。　　1.2免疫组织化学方法检测MMP-9的表达采用S-P法，MMP-9单克隆抗体购自北京中彬金桥生物技术有限公司，试验过程按照严格按照说明书进行，并设用PBS代替一抗作为阴性对照。　　1.3结果判定标准每张切片均由病理主治医师确诊，并分别观察具有代表性的10个高倍视野。MMP-9阳性染色者在细胞膜和(或)细胞浆有棕黄色颗粒沉着，根据细胞膜或胞浆的染色程度及染色细胞百分率进行分析评分，基本不着色者为0分，着色淡者为1分，着色适中者2分，着色深者为3分。着色细胞占计数细胞百分率≤5%为0分，6%-25%

4、为1分，26%~50%为2分，≥51%为3分。将每张切片着色程度得分与着色细胞百分率得分各自相乘，为其最后得分。0-1分为阴性，2-3分为弱阳性，≥4分为强阳性。弱阳性与强阳性均计为阳性。　　1.4统计学方法各组间比较用χ2检验或Fisher检验，以P<0.05为差异有统计学意义，所有统计学数据均用统计学软件分析完成。　　　　2结果　　　　2.1MMP-9在骨肉瘤、良性骨肿瘤中的表达46例骨肉瘤标本中37例MMP-9阳性表达，阳性表达率为80.4%，12例正常骨组织中无阳性表达，两者比较差异有统计学意义，

5、见表1。　　　　2.2MMP-9的表达与骨肉瘤临床病理特征的关系骨肉瘤中，不同软组织浸润、不同Ennecking分期的MMP-9表达比较差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。MMP-9在不同年龄、不同性别、不同肿瘤直径的分组表达中差异无统计学意义(P>0.05)。　　　　3讨论　　　　MMP-9是基质金属蛋白酶家族中的重要一员，又名明胶酶B，因能降解基底膜和细胞外基质的多种成分而倍爱关注。MMP-9位于染色体20q12-q13上，基因全长4506bp，含有13个外显子。主要作用底物为构成细胞外基

6、质基底膜支架的IV型胶原酶，另外还能降解V、VII、X型胶原、明胶、纤维连接蛋白等，有研究认为在组织发育、伤口愈合及肿瘤侵袭时被诱导表达[1]。杨猛[2]等用免疫组织化学二步法研究MMP-9在直肠癌中的表达，认为其可作为直肠癌浸润转移重要的分子标记物，对判断直肠癌的预后具有重要意义。徐晓辉[3]等用免疫组化SP法检测非小细胞肺癌中MMP-9的表达后发现其在肿瘤细胞中表达增加，MMP-9的阳性表达率随着肿瘤病理分级、临床分期的增设以及淋巴结转移的出现而表达增加，并认为其是肿瘤浸润、转移的促进因子。　　笔者的试验通

7、过免疫组化检测MMP-9在骨肉瘤中的表达，数据显示在骨肉瘤中的表达明显高于良性骨肿瘤，提示MMP-9在骨肉瘤的发生发展中起重要作用。通过临床病理特征的分析，观察到与骨肉瘤的软组织浸润密切相关，提示MMP-9可能是促进骨肉瘤浸润性生长的重要因素。由于Ennecking临床分期与患者预后相关，本试验也发现MMP-9与其相关，提示MMP-9是与骨肉瘤患都预后有关的重要因素。MMP-9的表达也可以作为判断肿瘤预后的重要指标。　　骨肉瘤的发生是一个多因素多阶段的过程，笔者的研究是从MMP-9蛋白表达方面来反映骨肉瘤的生物

8、学行为等因素。另有研究显示其抑制因子与肿瘤的发生发展有关，今后笔者可以继续研究MMP-9与抑制因子的关系，以进一步探讨骨肉瘤的发生发展。　　　　参考文献　　[1]PoletteM，Naorinvasionandmatrixmetallo-protEinases.CritRevOncolHemat2004，49(3)：179-186.　　[2]杨猛，刘霞，赵恭华，等.N-cadherin