欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:27131692
大小:1.91 MB
页数:42页
时间:2018-12-01
《《四节基因工程》ppt课件》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、第四节基因工程GeneEngineering基因工程定义基因工程:指通过人工方法将目的基因与载体DNA分子连接起来,然后导入受体细胞,从而使受体细胞获得新的遗传性状的一种崭新的育种措施.第一节基因工程概述一、基因工程的发展历史(一)理论上的三大发现:(二)技术上的三大发明:(三)基因工程的诞生(四)基因工程的几个方面3、60年代,Nirenbery等科学家确定了遗传信息的传递方式:DNA—RNA—蛋白质的中心法则。(一)理论上的三大发现1、1944年Avery的转化实验证明了核酸是遗传的物质基础2、1953年Watson和Crick弄清了生物遗传物质的分子机制:阐明了
2、DNA的双螺旋结构和半保留复制机理。3、基因工程的载体(质粒)的发现:从1946年起,LEDERBERG开始研究细菌的性因子--F因子,经过50年代和60年代,相继发现其它质粒,如抗药因子(R因子),到1973年COHEN将质粒作为基因工程的载体使用(二)技术上的三大发明1、DNA的特异切割1970年Smith和Wilcox等人从流感嗜血杆菌中分离出特异切割DNA的限制酶。从而为人们随意切割DNA提供了一把利剪。2、DNA连接酶的发现1967年,世界上有五个实验室几乎同时发现了DNA连接酶,这种酶能够参与DNA裂口的修复。(三)基因工程的诞生1973年,Cohen等实
3、现了细菌间性状的转移。这是基因工程发展史上第一次实现重组体转化成功的例子。基因工程从此诞生,这一年被定为基因工程诞生的元年。(四)基因工程的几个方面1、基因工程技术的“神奇”所在2、“多利”的克隆3、基因工程技术与我们1、基因工程技术的神奇所在??而通过基因工程技术现在只要用10L发酵液就可获得同样的产量。实例1胰岛素的提取:100000胰脏只能提取3~4克,而用“工程菌”进行发酵生产,则只要几升发酵液就可取得同样数量的产品。实例2生长激素释放因子(一种十四肽,能抑制其他激素的释放和治疗糖尿病):它原来要从羊的脑下垂体中提取,宰50万头羊也只能提取5毫克的产品,196
4、2约翰·格登宣布他用一个成年细胞克隆出一只蝌蚪1984斯蒂恩·威拉德森用胚胎细胞克隆出一只羊1996用成年哺乳动物细胞克隆出的个体克隆羊Dolly出世2000美国科学家用无性繁殖技术成功地克隆出一只猴子2001年美、意科学家联手展开克隆人的工作1996-2000欧美日俄中国等多国科学家成功克隆多种动物上世纪50年代科学家成功无性繁育出非洲爪蟾2、“多利”的克隆体细胞克隆技术-Dolly诞生记取出一个体细胞生产小羊胚胎体外培养植入母羊(第三只)细胞核置换取出一个卵细胞从克隆过程看"多利"克隆羊“多利”没有父亲,但却有着三个母亲三个母亲中,后两个只是形式上的母亲“多利”实
5、际上是第一个母亲的百分之百的“复制品”“多利”的这一发生过程就叫"无性繁殖"体细胞克隆成功率低将434个体细胞的核移植至434个去核卵中,产生的融合细胞为277个,成功率为63.8%将277个移植卵移到输卵管成功者247个,成功率为89.2%在输卵管能够发育到胚胎阶段者29个,成功率为11.7%将29个胚胎移植至13只代理母羊子宫中获得成功者为1个,妊娠率7.7%总的成功率为1:434,即用434个含体细胞核的卵移植入去核卵内,经过种种阶段,最后只产生出一只克隆羊。在一定条件下,已经分化过程的体细胞仍然是具有全能性的结论禁止“克隆”人被各国立法并已成联合国公约“克隆”
6、羊与“克隆”人之间在技术上不存在不可逾越的障碍3、基因工程技术与我们第二节基因工程原理一、基因工程工具酶二、核酸的提取操作和检测技术三、基因工程操作步骤一、基因工程工具酶——限制性内切酶2、命名和分类命名是根据分离出此酶的微生物学名而定的。即取微生物属名的第一个字母和种名的头两个字母组成三个斜体字母加以表示。如:EcoRI中的E表示大肠杆菌属名第一个字母,co表示种名头两个字母,R表示株名,I表示该菌中第一个被分离出的酶。1、定义:是指能识别双链DNA分子的特定序列,并在识别位点或其附近切割DNA的一类内切酶。3、限制性内切酶的基本特性(1)形成粘性末端(cohesi
7、veend/stickyend)(2)形成平末端(bluntend)常用限制酶的种类及切割方式切点出现的频率及片断大小部分消化和完全消化DNA限制酶分析其它工具酶连接酶T4DNALigase1967修补工具酶DNA聚合酶I大片断Klenow1971末端加工酶S1核酸酶,碱性磷酸单脂酶末端转移酶人工加polyA或polyT尾反转录酶二、核酸的提取操作和检测技术1、质粒DNA的提取2、电泳和DNA紫外检测M123Kb.23.19.46.54.32.32.0图6质粒酶切及去磷MλHindⅢmarkers1pUC182,3pUC18酶切二、基因工程的基本操作
此文档下载收益归作者所有