丝氨酸对宁南霉素生物合成的影响

《丝氨酸对宁南霉素生物合成的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、丝氨酸对宁南霉素生物合成的影响作者：代焕梅陈家任胡厚芝龙章富【摘要】研究宁南霉素发酵过程中如何通过加入前体来提高宁南霉素的产量，进行了添加前体种类选择、前体加入量和加入时间对比实验。结果表明，丝氨酸是较佳的合成前体。添加间接前体物A和B，对宁南霉素生物合成也有明显促进作用。在发酵24、36和42h分别添加丝氨酸、前体物A和B，宁南霉素发酵效价为对照的143%、130%和141%。【关键词】宁南霉素丝氨酸前体EffectofserineonbiosynthesisofningnanmycinABSTRACTIntheferment

2、ationprocessofningnanmycin,theimprovementoftheproductionofningnanmycinbyaddingprecursorsentssuchastheselectingofprecursors,theamountandthedifferentaddingtimeotethebiosynthesisofningnanmycin.Serine,precursorsAandBaddedatthe24h,36hand42hinthefermentationprocess,theferm

3、entationtiterofningnanmycinycin;Serine;Precursors龙章富，lzf0028163.宁南霉素(ningnanmycin)是中国科学院成都生物研究所、四川抗菌素工业研究所研发的一种高效、广谱、低毒、低残留、无蓄积、具有我国自主知识产权和且具有新化学结构的农用抗生素，于1997年获得中国专利权［1］。它能有效诱导植物产生酸性和碱性病情相关蛋白［2］，抑制植物病毒外壳蛋白的合成［3］，对许多植物病毒病的预防和治疗效果均高达80%［4～6］，广泛应用于水稻、小麦、玉米、大豆、马铃薯、烟草、香蕉

4、、木瓜、西瓜、番茄、辣椒、胡椒、大白菜、油菜、兰花等五个科，30多种植物病毒病的预防和治疗。销售推广到除西藏、青海以外的我国各省市以及东南亚、韩国和西班牙等海外各国，被视为目前最优良、应用最广泛的防治植物病毒病的生物农药之一。目前，世界各国的农药研发已进入优先确保对环境友好、利于人类健康为前提的新时代，因此，宁南霉素具有良好的研究和开发价值。宁南霉素对植物无药害且对植物病毒病具有很好的治疗效果，因此它具有广阔的市场前景。前期，通过对产生菌的菌种选育和发酵条件研究［7］，工业化生产发酵效价已达到15000μg/ml。但尚未涉足发酵

5、代谢调控研究。在抗生素发酵过程中加入前体调控代谢提高效价已有许多报道［8～12］，在红霉素、螺旋霉素、柱晶白霉素、纳他霉素、梅岭霉素的发酵过程中添加前体均明显提高了发酵效价，青霉素发酵中添加苯乙酸前体已在现代工业化生产中成功应用。宁南霉素属胞嘧啶核苷类抗生素，它的分子结构(Fig.1)由胞嘧啶、己糖、肌氨酸、丝氨酸等四部分组成［13］，这些组成单位既是糖氮代谢的初级产物，又是生物合成宁南霉素的前体，因此，通过添加外源性前体物，有可能使已培养好的菌体直接利用现成的添加物进行生物合成，提高发酵效价。Fig.1Molecularstr

6、uctureofningnanmycin1材料与方法1.1菌种诺尔斯链霉菌西昌变种(Streptomycesnourselvar.xichangensis)，经原生质体细胞融合、P32处理和氮离子注入诱变筛选获得N12菌株，摇瓶发酵效价19884μg/ml，以下试验结果中的相对效价均以此为100%计。1.2培养基斜面培养基(%)可溶性淀粉2.0，葡萄糖1.0，硝酸钾1.0，花生饼粉2.0，磷酸氢二钾0.5，硫酸镁0.5，氯化钠0.5，碳酸钙0.5，琼脂2.0，灭菌前pH7.2～7.4。种子培养基(%)玉米粉2.0，葡萄糖2.0

7、，花生饼粉2.5，酵母粉0.15，磷酸氢二钾0.02，硫酸镁0.0025，硫酸铵0.2，氯化钠0.3，碳酸钙0.5，灭菌前pH7.0。发酵培养基(%)玉米粉2.5，葡萄糖0.5，糊精3.5，花生饼粉3.5，酵母粉0.30，磷酸氢二钾0.1，硫酸镁0.05，氯化钠0.3，硫酸铵0.3，碳酸钙0.5，灭菌前pH7.0。1.3培养条件斜面培养条件28℃恒温培养10～12d。种子瓶培养条件28℃，装量30ml/250ml三角瓶，摇瓶转速200～220r/min，培养32～34h。发酵瓶培养条件28℃，装量30ml/250ml三角瓶，摇瓶

8、转速200～220r/min，接种量3ml，通气振荡培养60～70h。1.4发酵效价检测用微生物杯碟法测定，检定菌为腊状芽孢杆菌。2结果与分析2.1发酵液中己糖和氨基酸含量在宁南霉素发酵产素高峰末期取样，对其氨基酸种类、含量(结果见Tab.1)和己糖进行分析，己