何首乌化学成分研究进展

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1、何首乌化学成分研究进展【关键词】首乌关键词：何首乌；蒽醌；二苯乙烯苷；磷脂成分何首乌PolygonummultiflorumThunb.为蓼科植物何首乌的块根，相传此药名为交藤。具有味苦，甘，涩，微温，补益类之药〔1〕。具有乌须发、悦颜色、益精血、强筋健骨，抗衰老等功效。现代研究证明其中主要含有蒽醌类、二苯乙烯苷及磷脂类等活性成分〔2〕。1蒽醌类研究表明何首乌中蒽醌类有效成分主要为大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、大黄酸、芦荟大黄素。蒽醌类成分含量测定多以高效液相方法测定。郭青等〔3〕采用反相高效液相色谱法测定蒽醌类成分。采用InertsilODS-3柱，以甲醇∶0.1磷酸（85∶15）为流动相

2、，检测波长为254nm。得到大黄素、大黄素甲醚含量较高，大黄酚、大黄酸、芦荟大黄素含量则较低。此外随着地点采收及炮制方法不同对结果产生影响较大。葛秀允等〔4〕采用美国VarianMircoParkColumnMCh-10(φ4mm×25cm);流动相为甲醇∶水（90∶10）：流速0.6ml/min；柱温300C,紫外检测波长290nm，数据处理定量方法采用外标峰高法，对大黄素的含量进行测定。结果证明，采用此种方法是一种准确可靠的方法。2二苯乙烯苷2.1薄层扫描法马长华等〔5〕采用薄层扫描发测定二苯乙烯苷含量，硅胶G预制板，展开剂∶苯∶甲醇∶丙酮（44∶8∶4）上行法展开14cm，于紫外36

3、5nm观察，测定波长为305nm，参比波长为365nm,双波长，锯齿扫描，狭缝0.4mm×0.4mm，以生何首乌含量为100%，然后计算。此种方法为何首乌质量控制提供了依据。2.2紫外分光光度法姚桂根等〔6〕采用紫外分光光度法测定二苯乙烯苷。因为二苯乙烯苷的结构与白藜芦醇苷（Polydation）相似，且二者具有相似的紫外吸收光谱，因此采用白藜芦醇苷为标准品。在306nm波长测定二苯乙烯苷，结果：在10min内测定二苯乙烯苷稳定性好，灵敏度高（可测定1.0×10-6g/ml）。此法操作简便，对生产实践作质量考察应用较好。2.3荧光分光光度法姚桂根等〔7〕，采用荧光分光光度法测定二苯乙烯苷。

4、利用其酚羟基经Dansyl衍生化后具有强烈的荧光特征，就其Dansyl衍生物的荧光条件作了探索，拟定了荧光分光光度法条件。激发波长338nm，发射波长510nm，二苯乙烯苷溶液浓度在1.0×107～5.0×107g/ml。范围内衍生化后与荧光强度呈线形关系，荧光强度在2h内稳定。因其与白藜芦醇苷结构相似，具有相似紫外吸收，因此可选用白藜芦醇苷为对照品。但此法需要除去蒽醌类杂质的干扰。2.4酶化学法李光道等〔8〕采用酶化学法测定二苯乙烯苷。此法在采用Luminol-H2O2非催化体系，浓度为11.0×10-3mol/L，pH为10.3的NaHCO3-Na2CO3缓冲体系与H2O2发光反应灵敏

5、度高，稳定性好。在酶选择上用量为3.0u/ml,此时转化率最大并根据酶促反应特点温度控制在34℃,pH值为5.1，反应时间40min,二苯乙烯苷水解为60min,结果发现乙醇提取中无机离子少，但用乙醇提取乙醇对酶活性有较强的抑制作用，所以应先蒸出乙醇，活性C可以除去酶水解产物对酶促反应和发光反应的影响(最佳比例4∶1)。2.5高效液相色谱法张纯等〔9〕采用高效液相方法测定何首乌中二苯乙烯苷含量。以EconosphereC85μm(250mm×6.4mm)为固定相，甲醇∶水（30∶70）为流动相，紫外检测波长310nm，因采用二苯乙烯苷为对照品，所以与前几种方法测定的含量差异较大。此法精密度

6、高，但发现二苯乙烯苷在水中较稳定，在高于80℃时，对其结果产生较大影响，在酸中很不稳定。光强对其稳定性影响较大〔10〕。2.6高效毛细管电泳法袁海龙等〔11〕采用毛细管电泳法测定何首乌二苯乙烯苷含量方法。电解液为20mmol/L硼砂，检测波长为214nm二苯乙烯苷为对照品，因二苯乙烯苷有四个酚羟基具有酸性可在碱性中电离带负电。所以选用毛细管区带电泳(CZE)模式。二苯乙烯苷及内标的迁移时间随电解值不同而变化。结果20mmol/L硼砂(pH9.0)不仅能使二苯乙烯苷及内标的峰完全分离，提取测定分析无干扰峰，且分析时间短，柱效在20000以上。3磷脂成分3.1分光光度法李军等〔12〕采用钼蓝比

7、色法用721分光光度计测定。结果显示采收时对磷脂类成分有较大影响。3.2薄层色谱法许益民等〔13〕采用薄层法测定磷脂成分。对磷脂成分提取效率高而且对无机磷成分无干扰的Folch试剂〔14〕。由于磷脂成分易分解，应避免高温。根据磷脂成分不溶于丙酮〔15，16〕特征。采用二次同相展层法。先用丙酮展开，将中性脂分开而磷脂留在原点，再用磷脂展开剂将磷脂分开〔17〕，再用薄层显色剂采用磷脂专属Vaskovsky显色剂试剂，对磷脂类