持续性心房颤动心肌纤维化的实验研究

《持续性心房颤动心肌纤维化的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、持续性心房颤动心肌纤维化的实验研究作者：崔明玉，郭琳娜，姜丽萍，陈阿梅【摘要】目的探讨心房颤动心肌纤维化的发生机制。方法杂种犬15条，随机分三组：正常对照组、单纯房颤组、房颤+Miberfradil组。采用vanGieson染色、免疫组织化学方法，结合高清晰彩色图像分析系统，观察正常对照组、单纯房颤组和房颤+Miberfradil组心房组织总胶原、Ⅲ型胶原的表达。结果（1）单纯房颤组和房颤+Miberfradil组心房组织总胶原均明显高于正常对照组（P＜0.05）。房颤+Miberfradil组的

2、总胶原表达明显减少，与单纯房颤组相比较，差异有显著性（P＜0.05）。（2）单纯房颤组Ⅲ型胶原的表达明显高于正常对照组（P＜0.05）。房颤+Miberfradil组Ⅲ型胶原的表达明显低于单纯房颤组（P＜0.05）。结论持续性房颤有明显的心肌纤维化改变，T型钙通道阻滞剂能够减轻心肌纤维化的程度。【关键词】心房颤动；心肌纤维化；胶原纤维【Abstract】ObjectiveToinvestigatethemechanismsofthecardiacfibrosisduringatrialfibril

3、lation.MethodsFifteenadultmongreldogslydividedinto3group:pureatrialfibrillationgroup,atrialfibrillationaddedmibefradilgroupandcontrolgroup.van-Giesonstainmunohistochemistryandimageanalysis.Results（1）Totalcardiaccollagenibefradilgroupparedarkedlydecrea

4、sedinatrialfibrillationaddedmibefradilgroupparedarkedlyloibefradilgroupthanthatofpureatrialfibrillationgroup（P＜0.05）.ConclusionCardiacfibrosischannelblocker.【Keyin。起搏器埋置于皮下胸锁乳突肌表面的囊袋内。正常对照组不植入起搏器。房颤＋mibefradil组在术后第2天开始给mibefradil原药（瑞士罗士公司提供），按人与犬的药物剂量

5、换算计算用药量，制成口服胶囊，每日服1次。术后观测24周。处死动物前采血，用高效液相层析法紫外光测定mibefradil的血药浓度为8.56ng/ml。1.2实验方法取心肌组织标本常规甲醛固定，石蜡包埋切片，切片厚度3μm。常规脱蜡至水。1.2.1总胶原纤维检测蒸馏水洗5min，用vanGieson液染色45s,95%酒精6s,无水乙醇16s，松节油20s,封片。　1.2.2免疫组化染色检测Ⅲ型胶原（1）抗原修复：用枸橼酸盐缓冲液,97℃,18min，降至室温;（2）过氧化氢溶液孵育10min，水

6、洗2min,PBS冲洗5min×2,放入湿盒;（3）血清封闭15min;（4）加入一抗，放入4℃冰箱过夜；（5）PBS洗5min×3,滴加羊抗兔二抗，室温孵育25min,PBS冲洗5min×2;（6）滴加DAB显色液2.5min;（7）苏木素复染30s,脱水透明，中性树胶封片。1.2.3结果判断vanGieson液染色后，心肌纤维染成黄色，胶原染成红色，并在心肌间质中表达。结果用LEicaQWinV3高清晰彩色图像分析系统进行分析,每个标本选一张切片，每张切片随机选5个无血管视野进行统计分析，求得

7、平均值。免疫组化染色显示：Ⅲ型胶原阳性反应为棕黄色颗粒，在心肌间质中表达。结果用LEIcaQWinV3高清晰彩色图像分析系统进行分析,统计分析中不包括血管自身胶原。每张切片任意选5个视野进行统计分析，求得平均值。1.3统计学处理测量数据以x±s表示，组间比较采用方差分析，以P＜0.05为差异有显著性。2结果单纯房颤组和房颤+Miberfradil组的总胶原明显高于正常对照组，单纯房颤组总胶原又高于房颤+Miberfradil组，差异均有显著性（P＜0.05）。Ⅲ型胶原的表达在房颤组最高，房颤＋Mi

8、berfradil组居中，正常对照组最低。单纯房颤组与房颤+Miberfradil组相比，两组间差异有显著性（P＜0.05）。图像分析结果见表1。3讨论心肌纤维化是指心肌组织结构中胶原纤维过量聚集，胶原浓度明显增高或胶原容积分数显著增加［2］，它是心脏疾病发展到一定阶段的共同病理改变，是心肌结构重构的主要表现之一。到目前为止，房颤时心肌纤维化的机制尚不完全明了。心肌Ⅰ表1各组Ⅲ型胶原、总胶原的表达的图像分析结果注：与正常对照组比较，*P<0.05；与单纯房颤组比较，**P&l