哮喘患者外周血cd4+cd25+调节性t细胞与il 4, il 5的表达

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1、哮喘患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞与IL4,IL5的表达【摘要】目的：探讨哮喘患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞与IL4,IL5的水平变化及其相互关系.方法：采用流式细胞技术检测40例哮喘患者和40例健康对照者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的表达水平，采用ELISA法检测外周血中IL4,IL5水平.结果：哮喘患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞低于健康对照者(P<0.01)；急性发作期哮喘患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞低于非急性发作期(P&

2、lt;0.01)；哮喘患者IL4,IL5的表达水平高于健康对照者(P<0.05)；急性发作期患者IL4,IL5的表达水平高于非急性发作期(P<0.05)；急性发作期哮喘患者外周血CD4+CD25+T细胞与IL4,IL5的表达水平呈负相关（r分别为-0.675，-0.767,P<0.01）.结论：CD4+CD25+调节性T细胞在哮喘的疾病活动中起着重要作用，是导致哮喘患者细胞免疫失调的重要原因.【关键词】哮喘；CD4+CD25+T细胞；白细胞介素4；白细胞介素5　0引言　　

3、从1986年起,Thl/Th2平衡理论作为过敏性疾病如支气管哮喘发病机制中的核心已为大多数人所接受.在此基础上,T细胞尤其是调节性T细胞在支气管哮喘中的作用逐渐引起人们的关注.目前已知至少有4种主要的CD4+调节性T细胞在哮喘发病中起作用，包括Th3细胞，Tr1细胞，NKT细胞及CD4+CD25+T细胞［1］.而CD4+CD25+T细胞由于其具有独特的作用方式和功能特征,引起了国外学者的广泛关注［2-4］,但国内有关CD4+CD25+T细胞与哮喘关系的研究报道尚少,我们进行了这方面的研究,以期探讨哮喘

4、患者外周血CD4+CD25+T细胞的表达及其与Th2型细胞因子IL4，IL5表达水平的关系.　　1对象和方法　　1.1对象哮喘组：哮喘患者40（男20，女20）例，年龄（33.7±9.2）岁.所有病例均符合2003年中华医学会呼吸病学分会哮喘学组制定的支气管哮喘防治指南［5］中规定的诊断标准.其中急性发作期20例，该组患者中，轻中度12例，重度8例；非急性发作期20例.正常对照组：健康献血者40（男22，女18）例，年龄（30.5±8.8）岁，均无近期感染及过敏性疾病史.　　1.2方法　　1.2.

5、1CD4+CD25+T细胞的测定分别采集哮喘患者及健康献血者外周静脉血2mL，肝素抗凝；取肝素抗凝的全血100μL，加入CD4PE和CD25FITC单克隆抗体20μL,IgG1PE和IgG1FITC作为同型对照，室温闭光反应30min；加2mL溶血剂在室温下溶解红细胞约10min；PBS洗涤，离心5min（1500r/min),弃上清；每份标本加入1g/L多聚甲醛500μL后用流式细胞仪检测.流式细胞仪为BeckmanCoulterXL100(Coulter公司产品).　　1.2.2IL4

6、,IL5的测定清晨取静脉血3mL，离心后取血清，置于-70℃冰箱冻存.血清IL4，IL5的测定采用ELISA法.试剂盒购自上海森雄公司.操作步骤严格按说明书进行.　　统计学处理：实验数据以x±s表示，使用SPSS12.0统计软件进行两组间均数比较的t检验,CD4+CD25+T细胞百分率与IL4，IL5表达水平的关系采用秩相关分析，以P﹤0.05认为差异显著.　　2结果　　2.1哮喘组和对照组CD4+CD25+T细胞百分率及IL4,IL5的比较哮喘患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞

7、占CD4+T细胞的百分比明显低于健康对照者；IL4,IL5的表达水平明显高于健康对照组.性别，年龄与CD4+CD25+T细胞及IL4，IL5表达不相关（表1）.　　表1哮喘组和对照组CD4+CD25+T细胞百分率及IL4，IL5的比较（略）　　bP<0.01vs对照.　　2.2不同临床分期哮喘组CD4+CD25+T细胞百分率及IL4，IL5的比较急性发作期哮喘患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞比率明显低于非急性发作期哮喘患者；L4，IL5的表达水平高于非急性发作期患者

8、（表2）.　　表2急性发作期和非急性发作期CD4+CD25+T细胞百分率及IL4，IL5的比较（略）　　bP<0.01vs非急性发作期.　　2.3急性发作期哮喘患者CD4+CD25+T细胞百分率与IL4表达水平的相关性分析20例急性发作期哮喘患者IL4的表达水平为（37.2±10.2）ng/L，与CD4+CD25+T细胞百分率呈负相关（rs=-0.675,P<0.01），即随着哮喘患者外周血CD4+CD25+T细胞数量的减少，其IL