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时间:2018-11-22
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1、一种新的鼠大脑局部缺血模型论文.freelin时,其幅度超过灌注前20%.结论染色说明大脑左侧为缺血区,体感诱发电位幅度的增高,表明大脑处于兴奋性损伤状态.证实了此方法制成的大脑局部缺血可靠,且省时省力简便易行.Keyia;evokedpotential;animaldis-easemodelsAbstract:AIMTomakeaneiamod-elofrats.METHODSByperfusingnormalsalinefromthecatheterinsertedintheleftmoncarotidarteryostareasinleftcerebrumbecamedarkblue
2、ex-ceptthatcortexbecameslightblue.30minafterinfusion.freelplitudeofsomatosensoryevokedpotential(SEP)in-creasesbymorethan20%.CONCLUSIONStainingindi-catesthatleftcerebrumbeesischemia.TheaugmentofSEPamplitudesaysthatcerebrumisinexcitotoxicinjurystate.Ithasbeenprovedthatthisregionalcerebralischemiamod
3、elisreliableandeasytocarryout.0引言大脑局部缺血在基础和临床研究领域愈加受到重视,20世纪90年代以来,在大脑局部缺血和模型研究方面报道较多,其缺血模型大致有如下几种:①堵塞大脑中动脉:采用一较细的尼龙绳,尖端带热诱发气囊,经颈动脉插入大脑中动脉,在血液温度的诱发下而膨胀,堵塞大脑中动脉[1].这种方法在技术和材料上都有很高的要求,实验中困难较大.②增加颅内压使颅内血管阻力增大导致脑缺血[2],采用38℃下人工脑脊液经脑穿刺至脑室注射,使颅内压升高0.8kPa致使脑缺血.此方法对大脑损伤较大,且脑室内压不易控制,成功率较低.③漂浮导管法[3],技术难度高,缺血
4、程度不易掌握.④结扎大脑中动脉[4-6],经眼眶结扎大脑中动脉,此方法损伤较大,出血多.此外还有栓塞法、电解法等都易造成脑组织的损伤.我们的实验模型采用颈动脉灌流的方法,引起大脑局部缺血,实验证明其方法可靠、简便,易被采纳.1材料和方法1.1动物和麻醉SD大鼠20只,由本校实验动物中心提供,体质量为200~350g,雌雄不拘,戊巴比妥钠(35mgkg-1,iP)麻醉,待麻醉稳定后行气管插管.1.2插管和灌流分离左侧颈动脉1~1.5cm,结扎近心端,离心端剪斜口并插管,插管的后段接硅胶管与灌流泵相连,灌注生理盐水,灌注压为14kPa,灌流量0.2mLmin-1,灌流液温度为37℃,环境温度为
5、27℃左右.通过调节灌流泵的流量以控制大脑缺血的程度及范围.1.3实验分组将10只SD大鼠灌注生理盐水30min后,从三通管注射美蓝,处死后取出大脑,观察美蓝染色的部位和范围;另10只SD大鼠则用于观察在正常情况下灌注生理盐水30min时以及停止灌注30min时,依靠侧支循环改善或减轻缺血程度,观察体感诱发电位的变化.体感诱发电位引导的方法和指标为:在大鼠颈动脉插管后,用立体定向仪固定,沿正中线切开头皮,在离冠状缝与矢状缝2mm处对称打两个直径约1mm的小孔,将银球电极放入小孔内引导和记录体感诱发电位(SFP).采样频率为3022Hz,刺激电极放在对侧下肢,刺激强度为4.0mA,波宽为50
6、μs,频率为2.1Hz.2结果2.1SEP的变化灌注生理盐水30min时,SEP有明显的变化,其幅度超过正常SEP的20%.而停止灌注30min时,SEP与灌注30min时的SEP基本相同(Fig1).图1略2.2缺血区染蓝情况灌注美蓝后,取出大脑并做冠状切片发现,左侧大脑大部分区域被染蓝,大脑皮层部分着色稍浅,其余部分着色较深.右侧大脑几乎无着色(Fig2).3讨论由Fig2显示,左侧大脑皮层着色较浅,说明该区域的缺血程度较轻或侧支循环较丰富.而其他区域着色较深,显示该区域的缺血程度较重、侧支循环少,组织损伤重.由Fig1显示诱发电位的变化,诱发电位是指感觉传入系统受到刺激时,在中枢神经
7、系统内引起的电位变化.为了便于观察SEP,采用叠加的方法对SEP进行放大,同时又低消了脑电波的影响.图中显示灌注30min时的SEP比正常下SEP的幅度增加20%,表明大脑处于兴奋性损伤状态,从美蓝染色上不难看出,大脑皮层着色较浅,说明其缺血程度较轻,不致于在短时间内造成组织的坏死,而SEP的这些变化正说明了SEP能较敏感地反映脑兴奋性损伤.图2略综上所述,采用颈动脉灌流的方法导致局部脑缺血的模型,其方法可靠且有以下优点
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