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《塞来昔布对体外宫颈癌细胞株hela和siha的抑制作用论文》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、塞来昔布对体外宫颈癌细胞株Hela和Siha的抑制作用论文【摘要】目的:探讨环氧化酶抑制剂塞来昔布对Hela和Siha细胞株细胞周期及凋亡的影响。方法:采用细胞培养技术及流式细胞术检测环氧化酶抑制剂塞来昔布对人宫颈癌细胞株(Hela和Siha)细胞周期及凋亡的影响。结果:经流式细胞术分析显示,随着塞来昔布浓度的增加,Hela和Siha细胞周期中G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2~M期细胞比例无明显改变。与塞来昔布(≥25μmol/L)共同孵育72h后,与空白对照组相比PI指数减小(P<0.05),凋亡率增高(P<0.05)。流式分析图中可见亚二倍体凋
2、亡峰。结论:环氧化酶抑制剂塞来昔布可抑制体外人宫颈癌细胞株Hela和Siha的增殖、促进细胞凋亡。【关键词】宫颈癌;塞来昔布;流式细胞术AbstractObjective:Tostudytheinhibitoryeffectsofcelecoxib,aselectivecyclooxygenase-2inhibitor,ontacelllinesinvitro.Methods:Theeffectofcellcycleandcellapoptoticratesetry(FCM).Results:ByFACS,itol/L)for72hours,theprol
3、iferationindexes(PI)mitinFACSgraph.Conclusion:CelecoxibinhibitedtheproliferationandinducedtheapoptosisofSihaandHelacelllinesinvitro.Keyetry宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤,是癌症造成妇女死亡的第二位原因。近年来的研究表明.freela公司。塞来昔布购自山西威尔克科技发展公司,并溶于100%二甲基亚砜中,存于4℃备用。细胞培养与流式细胞分析均于山西医科大学中心实验室进行。1.2方法1.2.1细胞的培养:人宫颈癌细胞株(Hel
4、a和Siha)采用RPMI1640培养液,内含10%灭活小牛血清,常规培养于37℃、5%CO2、饱和湿度的孵箱中,用0.25%胰酶消化传代。1.2.2与药物共同孵育后经流式细胞仪分析:选对数生长期的细胞按1×105/mL的浓度接种于六孔培养板中,次日更换培养液后与不同浓度的塞来昔布共同孵育,使其终浓度分别为12.5μmol/L,25μmol/L,50μmol/L,并设相应的空白对照组,空白对照组及各不同浓度组均做两瓶。共同培养72h后胰酶消化(0.25%),收集细胞制成1×106/mL的单细胞悬液,加入4℃预冷的70%乙醇固定细胞,PBS漂洗2次,用1mL
5、PBS液重新悬浮细胞,加碘化丙啶,避光染色20min后通过流式细胞仪检测,应用DNA细胞周期分析软件,计算出各样品DNA含量,分析细胞周期及凋亡率。细胞的增殖活性以增殖指数(proliferativeindex,PI)表示,计算公式为:PI(%)=(S%+G2~M%)/(G0~G1%+S%+G2~M%)×100%。1.2.3统计方法:采用SPSSfor期细胞比例无明显改变,PI增殖指数减小,细胞凋亡率增加,流式图中可见亚二倍体凋亡峰。实验结果提示,这种药物主要是通过将细胞阻滞在细胞周期的G0~G1期,从而不同程度地抑制了体外人宫颈癌细胞株Hela和Siha
6、的增殖,并诱导细胞凋亡。Douglas等已分别对人结肠癌、直肠癌、皮肤癌、脑胶质细胞瘤、胰腺癌等细胞进行NS398(一种选择性COX-2抑制剂)体外抑制作用,结果均提示,NS398能够抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡[3]。有研究认为,一方面COX抑制剂可通过调节bcl-2家族的表达诱导细胞凋亡[4];另一方面,.freelacologicaltargetforthepreventionofcancer.LancetOnclol,2001,2:544~555.[2]OshimaM,DinchukJE,KargmanSL,etal.Suppressionofint
7、estinalpolyposisinAPCdelta716knockoutmicebyinhibitionofcyclooxygenase-2(COX-2).Cell,1996,87:803~809.[3]DouglasJE,Elder,DaancolorectaladenomaandcarcinomacelllinesbytheCyclooxygenase-2-selectiveNon-steroidalanti-inflammatorydrugNS398.IntJCancer,2000,86:553~560.[4]Aggarethacin-induce
8、dapoptosisinesophagealadenocarcin