塞来昔布对体外宫颈癌细胞株hela和siha的抑制作用

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1、塞来昔布对体外宫颈癌细胞株Hela和Siha的抑制作用【摘要】目的：探讨环氧化酶抑制剂塞来昔布对Hela和Siha细胞株细胞周期及凋亡的影响。方法：采用细胞培养技术及流式细胞术检测环氧化酶抑制剂塞来昔布对人宫颈癌细胞株（Hela和Siha）细胞周期及凋亡的影响。结果：经流式细胞术分析显示，随着塞来昔布浓度的增加，Hela和Siha细胞周期中G0/G1期细胞增多，S期细胞减少，G２～M期细胞比例无明显改变。与塞来昔布（≥25μmol/L）共同孵育72h后，与空白对照组相比PI指数减小（P＜0.05），凋亡率增高（P＜0.05）。流式分析图中可见亚二倍体凋亡峰。结论：环氧化酶抑制剂塞来昔布可抑制体

2、外人宫颈癌细胞株Hela和Siha的增殖、促进细胞凋亡。【关键词】宫颈癌；塞来昔布；流式细胞术AbstractObjective:Tostudytheinhibitoryeffectsofcelecoxib,aselectivecyclooxygenase-2inhibitor,ontacelllinesinvitro.Methods:Theeffectofcellcycleandcellapoptoticratesetry(FCM).Results:ByFACS,itol/L）for72hours,theproliferationindexes(PI)mitinFACSgraph.Concl

3、usion:CelecoxibinhibitedtheproliferationandinducedtheapoptosisofSihaandHelacelllinesinvitro.Keyetry宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤，是癌症造成妇女死亡的第二位原因。近年来的研究表明，环氧化酶(COX)，尤其是COX-2，与多种上皮性肿瘤的发生、发展关系密切〔１〕，并发现COX抑制剂在抑制肿瘤的发生、发展过程中发挥一定作用，但有关环氧化酶及其抑制剂与宫颈癌发生、发展之间关系的研究较少，因此我们采用细胞培养技术及流式细胞术检测选择性COX-2抑制剂塞来昔布对人宫颈癌细胞株（Hela和Siha）增殖和凋亡

4、的影响，为进一步探讨COX抑制剂抗肿瘤作用的机制及其临床应用积累资料。1材料与方法1.1材料人宫颈癌细胞株Hela及Siha购自第四军医大学附属西京医院妇产科实验室。培养基RPMI1640购自GibcoBRL公司，小牛血清购自杭州四季青生物公司，胰酶购自sigma公司。塞来昔布购自山西威尔克科技发展公司，并溶于100％二甲基亚砜中，存于4℃备用。细胞培养与流式细胞分析均于山西医科大学中心实验室进行。1.2方法1.2.1细胞的培养：人宫颈癌细胞株（Hela和Siha）采用RPMI1640培养液，内含10％灭活小牛血清，常规培养于37℃、5％CO2、饱和湿度的孵箱中，用0.25％胰酶消化传代。1.

5、2.2与药物共同孵育后经流式细胞仪分析：选对数生长期的细胞按1×105/mL的浓度接种于六孔培养板中，次日更换培养液后与不同浓度的塞来昔布共同孵育，使其终浓度分别为12.5μmol/L，25μmol/L，50μmol/L，并设相应的空白对照组，空白对照组及各不同浓度组均做两瓶。共同培养72h后胰酶消化（0.25％），收集细胞制成1×106/mL的单细胞悬液，加入4℃预冷的70％乙醇固定细胞，PBS漂洗2次，用1mLPBS液重新悬浮细胞，加碘化丙啶，避光染色20min后通过流式细胞仪检测,应用DNA细胞周期分析软件，计算出各样品DNA含量，分析细胞周期及凋亡率。细胞的增殖活性以增殖指数(prol

6、iferativeindex,PI)表示，计算公式为:PI(%)=（S％+G2～M％）/（G0～G1％+S％+G2～M％）×100%。1.2.3统计方法：采用SPSSforWindow10.0软件包进行统计分析，多个样本均数间的比较用方差分析，P＜0.05为有统计学意义。2结果塞来昔布对Hela和Siha细胞周期及细胞凋亡的影响：如表1、表2所示，与各浓度的塞来昔布共同孵育72h后，随着药物浓度的增加，Siha及Hela细胞周期发生变化：G0～G1期细胞增多，S期细胞减少，G2～M期细胞比例无明显改变。同对照组相比Siha及Hela细胞PI增殖指数减小（P＜0.05），凋亡率增高（P＜0.05

7、），流式分析图中可见亚二倍体凋亡峰（见表3，图1、图2）。表1塞来昔布对Siha细胞株细胞周期的影响表2塞来昔布对Hela细胞株细胞周期的影响表3塞来昔布对Siha/Hela细胞株PI增殖指数及凋亡率的影响*与空白对照组相比，差异有统计学意义（P＜0.05）3讨论环氧化酶抑制剂属于非甾体类抗炎药（NSAIDs），临床上常用于消炎、镇痛、解热等治疗。自100年前第一种NSAIDs药物阿司匹林由Fel