大青叶中靛玉红的超临界萃取工艺及含量测定

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1、大青叶中靛玉红的超临界萃取工艺及含量测定【关键词】大青叶  SFEtechnologyofindirubinfromDaqingyeandcontentdeterminationofindirubin 【Abstract】AIM:TouseHPLCforthecontentdeterminationofindirubininsupercriticalfluidextraction(SFE)materialfromDaqingyeandtooptimizetheprocessofSFE.METHODS:Contentofindi

2、rubinperatureandpressure,separationtemperatureandpressure.AHPLCsysteminethecontentofindirubin.RESULTS:Optimalprogramperature50℃andpressure40MPa,separationtemperature40℃andpressure8MPa.Theaveragerecoveryofindirubinperature,extractionpressureandseparationpressureallha

3、vesignificanteffectsontheextractionrateofindirubin.TheHPLCmethodissimple,preciseandsuitableforthecontentdeterminationofindirubininSFEmaterialofDaqingye.  【Keyatography,highpressureliquid  【摘要】目的:建立用HPLC测定大青叶的超临界萃取物中靛玉红含量的方法,对萃取工艺进行优选.方法:采用超临界萃取法进行L9(34)正交实验.以靛玉红含量考察

4、萃取温度、萃取压力、分离温度及分离压力四个因素的影响.采用HPLC法测定萃取物中靛玉红含量.结果:最佳萃取工艺为萃取温度50℃,萃取压力40MPa,分离温度40℃及分离压力8MPa.靛玉红平均回收率为102.8%,RSD为1.48%.结论:萃取温度、萃取压力及分离压力对大青叶中靛玉红的萃取都有显著影响.HPLC法操作简便,结果准确,可作为超临界萃取大青叶中靛玉红的质量控制方法.  【关键词】大青叶;CO2超临界萃取;靛玉红;色谱法,高压液相  0引言  靛玉红主要来源于植物马蓝(Baphicacanthuscusia)、蓼蓝(

5、Polygonumtinctorium)及菘蓝(Isatisindigotica)的中药材如大青叶、板蓝根、青黛等,靛玉红是其主要有效成分.靛玉红有治疗慢性髓性白血病作用,是一种应用前景广阔的抗肿瘤成分[1].  靛玉红在中药材中含量很低,为减少药物使用量,提高生物利用度,我们用超临界流体萃取(SFE)法对大青叶中的靛玉红进行分离提纯,同时建立萃取物中靛玉红含量的HPLC测定方法,优化靛玉红SFE工艺.  1材料和方法  1.1材料GoldenSystem高效液相色谱仪(美国Beckman公司),配125型高压双泵,168型二

6、极管阵列检测器;色谱柱:SynersiFusionRP柱(4.6mm×250mm,4μm,美国Phenomenex公司);FY2215006超临界萃取仪(南通市飞宇石油科技开发有限公司);R200D电子分析天平(德国Satorius公司);旋转蒸发仪(EYELAASPIRATORA3SRIKAKIKATCO.LTD).大青叶购自西安药材市场,按照中国药典(2005年版)有关大青叶项下鉴定本品为合格药材;靛玉红对照品购自中国药品生物制品检定所,批号717200204;甲醇为HPLC级(美国FISHER公司),水为超纯水,其余试剂

7、均为AR级.  1.2方法  1.2.1SFE正交实验设计采用L9(34)设计,选择萃取温度、萃取压力、分离温度及分离压力四个因素,每个因素取3水平.分别为萃取温度40,50及60℃;萃取压力20,30及40MPa;分离温度30,40及50℃;分离压力8,10及12MPa.  1.2.2供试品溶液的制备打开超临界萃取仪,按1.2.1的设计设置萃取仪温度参数,预热完毕后将精密称取的大青叶50g放入萃取缸Ⅱ,按1.2.1的设计将压力值调整到需要的参数,同时向副泵系统下的夹带剂缸中加入氯仿100mL,开动副泵,开始萃取.每半小时收集

8、一次分离液,至2h内连续收集不到液体时停止该次实验.将收集到的分离液在旋转蒸发仪上蒸干,用甲醇定容于10mL容量瓶中,作为供试品溶液.  1.2.3色谱条件以甲醇0.015mol/L醋酸铵(72∶28)(用醋酸以1∶150的比例调节pH值)为流动相;流速为1.0mL/min;

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