超声辅助提取厚朴叶中厚朴酚及和厚朴酚的研究论文

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1、超声辅助提取厚朴叶中厚朴酚及和厚朴酚的研究论文【摘要】目的研究超声辅助提取厚朴叶中厚朴酚及和厚朴酚的方法。方法采用正交实验进行提取方法的研究,用HPLC法测定厚朴酚及和厚朴酚的含量,流动相为甲醇-水-冰醋酸(85∶15∶0.25),流速为1.0ml/min,检测波长为294nm,柱温为23℃。结果用超声强度中等、酒精浓度100%、提取时间为24h以及料液比1∶40的提取条件可很好地提取厚朴叶中的厚朴酚及和厚朴酚,和厚朴酚、厚朴酚以及总酚的提取率分别为92.15%,70.83%和85.27%;RP-HPLC方法较好.freelethodforMagnolo

2、landHonokiolinleavesofMagnoliaoffcinalisRendetethodsTheextractionmethodizedbyorthogonalexperimentandthecontentsinedbyHPLC.Results100%ethanol,extracting24hours,rationofmaterialstoliquid1∶40andmiddleintensityofultrasonicalextractingmethod.TheextractingrateofMagnololiningmethodple,r

3、apidandaccurate.ConclusionTheultrasonicextractingmethodispracticableforMagnololandHonokiolinleavesofMagnoliaoffcinalisRendet)C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水(79∶21),流速1.0ml/min,检测波长294nm,柱温23℃,进样量20μl。1.3.4线性范围考察精密称取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量,加甲醇制成每毫升含厚朴酚标准品360,180,90,45,22.5,11.25,5.6μg以及每毫升含和厚

4、朴酚标准品440,220,110,55,27.5,13.75,6.875μg的浓度梯度,分别吸取溶液20μl,注入HPLC仪测定。以对照品浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,进行线性回归。1.3.5精密度实验取厚朴酚90μg/ml以及和厚朴酚浓度为110μg/ml的对照品溶液,重复进样6次,记录色谱峰面积,计算RSD。1.3.6重复性实验取索氏提取的一个样品,依法平行测定5次,记录厚朴酚与和厚朴酚的色谱峰面积,计算RSD。1.3.7稳定性实验取索氏提取的一个样品,每隔2h进样1次,共进样5次,考察供试品溶液的稳定性。1.3.8回收率实验取已测知

5、含量的样品5份,分别精密加入对照品适量,依RP-HPLC法测定,计算回收率,RSD。2结果2.1HPLC结果及标准品线性关系在前述色谱条件下,厚朴酚与和厚朴酚与其他成分能够很好地分离(图1);以对照品浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,进行线性回归。厚朴酚浓度在5.6~360μg/ml,和厚朴酚浓度在6.875~440μg/ml范围内与峰面积线性关系良好。回归方程为:厚朴酚Y=0.634724X-3.02791,R=0.99775;和厚朴酚Y=0.579992X-5.02817,R=0.996795。2.2超声提取正交实验结果各因素对和厚朴酚提

6、取的重要性为A>C>B>D,对厚朴酚提取的重要性为C>D>A>B,对总酚提取的重要性为C>A>B>D;综合考虑,超声提取最优方法为:超声强度中等,酒精度100%,提取时间为24h,料液比1∶40。2.3优选提取方法的验证采用上述最优方法提取3次,和厚朴酚、厚朴酚以及总酚的提取率分别平均为92.15%,70.83%和85.27%,表明本方法的提取效果较好。2.4精密度实验结果取厚朴酚以及和厚朴酚浓度为100μg/ml的对照品溶液,重复进样6次,记录色谱峰面积,计算得厚朴酚与和厚朴酚的RSD分别为1.24%,1.47%。2.5重复性实验取索氏提取的一个样品,

7、依法平行测定5次,记录厚朴酚与和厚朴酚的色谱峰面积,计算得厚朴酚与和厚朴酚的RSD分别为1.05%,1.33%。2.6稳定性实验取索氏提取的一个样品,每隔2h进样1次,共进样5次,结果供试品溶液在10h内稳定,厚朴酚与和厚朴酚的RSD分别为1.31%,1.81%。2.7回收率实验取已测知含量的样品5份,分别精密加入对照品适量,依RP-HPLC法测定,结果见表3,表4,和厚朴酚的平均回收率为97.89%,RSD为0.83%;厚朴酚的平均回收率为97.58%,RSD为1.2%;本研究的RP-HPLC测定法的回收率较好,方法是可行的。表2超声提取正交实验结果(

8、略)表3和厚朴酚回收率(略)表4厚朴酚回收率(略)3讨论厚朴是一种应用较广的重要

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