天山花楸叶醇提液的絮凝工艺

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1、天山花楸叶醇提液的絮凝工艺作者：王鲁妹，张芹，唐辉，马伟伟【摘要】　　目的优选壳聚糖用于天山花楸醇提液的纯化工艺。方法以总黄酮损失率、溶液中透光率和固形物收率为指标考察工艺3个因素对絮凝的影响。结果天山花楸醇提液絮凝工艺为：1%壳聚糖溶液加入量8%（V/V），温度50℃，药液pH值为5.0。结论该工艺条件下醇提液澄清效果良好。【关键词】天山花楸壳聚糖絮凝　　天山花楸为蔷薇科(Rosaceae)花楸属植物SorbustianshanicaRupr，系新疆维吾尔族和哈萨克族民间用药，《新疆维吾尔自治区药品标准》（第一册）记载：民

2、间以嫩枝叶、果实和茎皮入药。嫩枝叶和茎皮：味苦，性寒，无毒；果实：味甘苦，性平。功能：清热利肺，补脾生津，止咳；主治肺结核、哮喘、咳嗽、胃炎、胃痛、维生素A和维生素C缺乏症。　　天山花楸叶的醇提液含有鞣质、叶绿素、蛋白质等大分子物质，由于要对天山花楸叶醇提液的有效成分进行分离纯化，必须除去鞣质、叶绿素、蛋白质等大分子物质，因为鞣质、叶绿素、蛋白质等大分子物质能够污染树脂，影响树脂再生，因而需要进行絮凝，以除去鞣质、叶绿素、蛋白质等大分子物质，才能进行分离纯化。　　絮凝澄清专用壳聚糖应用于水质净化、果汁澄清、酒类除浊、废水处理

3、、中药澄清、大分子物质回收等领域，具有天然、安全、无毒、无害且价格合适、实验操作方便等特点。本研究拟采用壳聚糖对其醇提液进行絮凝工艺的研究；絮凝后醇提液采用以透光率高、总黄酮含量变化小并且固形物收率低为指标优选天山花楸叶醇提液的絮凝工艺。　　1仪器与试剂　　1.1仪器　　日本岛津UV2401（PC）紫外光谱仪，德国SartoriusBP211D电子分析天平，上海雷磁PHS-3C酸度计，北京长安HH.S1-Ni电热恒温水浴锅。　　1.2试剂与配制　　冰醋酸、氢氧化钠、硝酸铝、亚硝酸钠、盐酸等均为分析纯，1%壳聚糖溶液(自制)。

4、1%壳聚糖溶液的配制：取2ml冰醋酸，用蒸馏水将其稀释到50ml，精密称取1g壳聚糖放入其中，使其完全溶解，最后用蒸馏水将其定容到100ml，配制成1%的壳聚糖溶液，待用。　　1.3供试品的制备　　精密称取10g天山花楸叶倒入烧瓶中，每瓶加入60%的乙醇液100ml，进行冷凝回流提取30min，得醇提液并定容到100ml，备用。　　2方法　　2.1絮凝［1］方法　　将天山花楸醇提液调至一定的pH值，然后精密移取50.0ml至比色管中，加入一定量的壳聚糖溶液，混合均匀，静置过夜。然后移取上清液，进行澄清度的透光率的测定和黄酮含

5、量的测定。　　2.2杂质透光率的测定　　天山花楸叶的醇粗提液经全波扫描可知，在665nm处有一吸收峰，而醇粗提液絮凝后此峰处的［2］吸光度明显降低，可知此峰即为杂质峰，且除杂效果明显，故选择665nm作为透光率的测定波长；因此，以60%的乙醇为空白，在紫外可见分光光度计上665nm处测定粗提液、絮凝液均稀释10倍后的透光率。　　2.3有效成分总黄酮含量的测定［3］　　用移液管精密移取0.2ml上清液于25ml的容量瓶中，加入1ml5%的亚硝酸钠，6min后，加入1ml10%的硝酸铝，6min后，加入10ml4%的氢氧化钠，然

6、后用蒸馏水定容，15min后，在510nm处测定总黄酮吸光度。代入已建立的标准曲线方程：A=0.1251C+0.018，R2=0.9999，并计算总黄酮含量。　　2.4固形物收率的测定［4］　　取各样品液20ml，按固形物测定方法测定固形物重，并计算其收率。　　3结果　　3.1壳聚糖加入量对絮凝效果的影响［5］　　在絮凝温度室温、醇提液pH值为5.5条件下，将1%壳聚糖加入量设定为5个水平，即分别向醇提液中加入1，2，3，4，5ml壳聚糖溶液。按照以上的实验方法进行实验。结果见表1。表1壳聚糖加入量对絮凝效果的影响（略）　　

7、综合总黄酮含量、透光率和固形物收率这3项指标，壳聚糖用量为4ml，即壳聚糖用量相当于粗提液8%时，絮凝效果较好。　　3.2絮凝温度对絮凝效果的影响　　设定实验条件如下：醇提液pH值为5.5，壳聚糖加入量为4ml，絮凝温度设定为5个水平，即20，30，40，50，60℃。按照以上的实验方法进行实验。结果见表2。表2絮凝温度对絮凝效果的影响（略）　　综合总黄酮含量、透光率和固形物收率这3项指标，絮凝温度在50℃时，絮凝效果较好。　　3.3醇提液的pH对絮凝效果的影响［6］　　设定实验条件：絮凝温度50℃，壳聚糖加入量为4ml，醇

8、提液pH设定为5个水平即3.5，4.0，4.5，5.0，5.5。按照以上实验方法进行实验。结果见表3。表3醇提液的pH对絮凝效果的影响（略）　　综合总黄酮含量、透光率和固形物收率这3项指标，醇提液pH在5.0时，絮凝效果较好。　　4讨论［7］　　由于天山花楸叶的醇提液含有大量的叶绿素、鞣质