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时间:2018-11-15
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1、翻白草不同方法提取物对小鼠降血糖作用翻白草(PotentilladiscolorBunge)为蔷薇科委陵菜属多年生草本植物,根部或干燥全草均可入药。全国各地均有分布,为我国传统中药〔1〕。近年来,民间流行用翻白草治疗糖尿病并取得一定的疗效。为了解翻白草降血糖作用机制,开发糖尿病新药或保健品,本研究对翻白草进行提取,按极性不同的3个部分,利用四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠模型进行活性筛选,以确定具有较强降血糖活性的部分。 1材料与方法 11实验动物昆明种小鼠(雄性)100只(昆明动物所)(合格证编号:滇实验动物证第2002106号)。
2、 12主要试剂及仪器四氧嘧啶(美国Sigma公司);葡萄糖测定试剂盒(上海荣盛生物技术有限公司,批号20030101):消渴丸(广州中一药业有限公司,批号:E01895);722型光栅分光光度计(上海分析仪器总厂)。 13方法 131样品提取并初步分离利用乙醇浸提,乙酸乙酯萃取,D101大孔树脂柱层析,将翻白草分为I~Ⅲ部分,分别对应D101大孔树脂水洗脱部分、D101大孔树脂甲醇洗脱部分、乙酸乙酯萃取物。 132实验动物糖尿病模型的建立〔2,3〕实验动物体重(26±2)g,禁食16h,准备给予四氧嘧啶造模。四氧
3、嘧啶溶液临用前配制,浓度为12mg/ml。给药方式为腹腔注射,剂量120mg/(kg·bmol/L的糖尿病模型小鼠分组进行翻白草降血糖实验。 133实验动物分组及处理取血糖值>12mmol/L的糖尿病模型小鼠54只,正常小鼠10只作为对照组,共计64只,分为6组,分为糖尿病模型组(11只)、阳性对照组(10只)和3个实验组(各11只)。正常对照组、糖尿病模型组给予蒸馏水,剂量为每天450mg/(kg·bg/(kg·b. 134统计分析采用SPSS110统计软件,进行方差分析及t检验。 2结果 实验组Ⅰ、Ⅱ与糖
4、尿病模型组比较,血糖值降低差异无统计学意义(P>005),表明对糖尿病小鼠降血糖作用不明显。而消渴丸组与实验组Ⅲ与糖尿病模型组比较,血糖降低差异有统计学意义(P<005),表明实验组Ⅲ即乙酸乙酯部分对糖尿病小鼠有降血糖作用,其降血糖效果与降糖药物消渴丸类似。因此,可认为翻白草降血糖活性成分主要存在于乙酸乙酯部分,将该部分进一步研究,见表1。实验期间,通过对动物体重的观察可知,糖尿病模型组动物体重增长缓慢,其余各组动物体重均稳定增长,但各组之间比较差异无统计学意义(P>005),可认为翻白草各部分对糖尿病小鼠的
5、体重没有影响。 表1翻白草对糖尿病小鼠血糖水平的影响(略) 注:与糖尿病模型组比较,aP<005:与实验前比较,cP<005;与糖尿病模型组比较,bP<001;与其余各组比较,dP<001 正常小鼠的血糖、体重与正常对照组比较差异无统计学意义(P>005),可认为翻白草的乙酸乙酯部分对正常小鼠的体重、血糖均无影响。 3讨论 翻白草的根主要含鞣质及黄酮类化合物〔1〕。黄酮类化合物具有多种生理活性,也具有降血糖的活性,其降血糖机制是多方面的〔4,5〕。提示其降血糖活性成分可能是其中的黄酮
6、类物质。本实验结果表明,翻白草乙酸乙酯萃取物具有较强的降血糖作用,并且对正常小鼠的体重、血糖均无影响。其降血糖活性成分可能是其中的黄酮类物质,其降血糖作用机制有待进一步研究。而其余2个部分未显示降血糖作用,原因可能是提取分离过程中一些成分发生损失,或在该剂量下未能显示降血糖活性。【参考
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