he制片质量控制要求

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1、HE制片质量控制要求孙其兰魏颖杨翠玲(山东省平阴县中医医院山东平阴250400)【中图分类号】R197.4【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2012)20-0368-02病理检查是诊断疾病的最可靠的手段之一，病理诊断的准确性取决于病理医师的业务水平外，在很大程度上有赖于对大体标木全面细致的检查和取材，病理切片的质量控制及科学化的管理，病理切片工作是病理学诊断的一项重要组成部分，广泛应用与临床教学和科研工作，很大程度上指导临床医生的手术方式和治疗方案，病理学发展到见天，有了大量的新技新方法，

2、但是常规的HE制片技术仍然是外科病理检验中最基础的、最可靠的无可替代的一项工作，病理检验离不开HE制片，因此HE制片技术的质量控制要求一直是病理诊断工作的重中之重，在病理技术工作中做一张优质的HE切片并不难，难的是做好所有的病理切片，有时候一个细小的环节出现问题会导致以后所有的制片步骤，木文旨在如何控制HE切片的质量，使HE制片工作规范化、标准化。1.组织的固定是HE制片的第一步也是最关键的一步手术切除的组织标木应及时放入固定液中固定，固定液一般为10%中性福尔马林，其量不应少于标木体积的4倍，标木容器

3、上要标明病人的姓名，及所取组织的部位、块数、以免混淆，标木充分固定12-24小时候方可进行大体检查和取材，特殊固定液固定的标木，应当根据各种固定液的性能做适当处理。2.取材取材的厚薄、好坏直接影响切片的质量，首先刀锋要锋利，切出的组织块要厚薄均匀，一般面和为1.5×1.5cm,厚度不大于3mm,切面尽量平整，如系骨组织或钙化物，先行脱钙处理。较容易发脆的组织可适当厚一些，如甲状腺、肝脏、淋巴结、脂肪等。3.脱水和透明及浸蜡组织的处理吋间视组织的性质和组织块的大小而有所不同，脱水是否彻底直接关

4、系到组织能否充分透明，而组织脱水过度容易使组织过脆过硬，所以组织脱水时间要控制好，特别是在高浓度酒精和二甲苯中，组织在无水酒精中的吋间是2-3小吋，在二甲苯的吋间是1-2小吋，低浓度的酒精具有很大的穿透力,比无水洒精更具穿透力，更容易渗透到组织使组织脱水，在高浓度酒精里只需脱去从低浓度到高浓度之间的水份，因此组织在低浓度酒精中吋间延长一些可以脱去组织中的水分。一般组织块的处理步骤及吋间：70%的洒精2小吋，80%的洒精2小吋，95%的洒精2缸各1-1.5小吋，无水洒精3缸各1小吋，二甲苯2缸各20-30

5、分钟，石蜡3缸各1-2小时。石蜡•-般室温15-18度的情况下蜡温为56-58度为宜。1.组织包埋送检组织经过固定脱水透明浸蜡等处理措施后可进行包埋切片，包埋通常采用组织的最大面，要压平组织的包埋面，以免造成组织切片不完整，对于管腔囊壁组织要垂直包埋,小块多颗组织要尽量放在一起，并保证在一个平面上，注意组织包埋的方向，组织的层次，纤维肌肉等的走向应与切片刀平行,较难切的部分应放在上面,如皮肤的表皮，肿块的包膜，胃肠道的黏膜等.这样可以减少组织的断裂现象。2.切片(1)准备工作切片刀要锋利(2)待切蜡块要

6、用冰块冷却，或置冰箱中冷却,以增强其硬度.一般选用一次性刀片,切片要求完整，用力要平稳，蜡块切面与刀刃夹角一般为20度左右，要求厚度为4-6um,淋巴结鼻咽扁桃体可为2-3um脂肪可为5-6um。将蜡片光滑的一面向下置于温水中，水温一•般为40-45之间，并用镊子帮助展平，选择完整无划痕厚薄均匀的蜡片贴附到载玻片上。(3)贴附时石蜡片与玻片之间无气泡，玻片一端应留有1/3位置贴号码签用。将蜡片贴附在另外2/3的中心位置。1.烤片烤片在60-65度温箱中进行，吋间为20-30分钟，掌握好吋间，吋间不够或过

7、长在染色过程中容易脱片，温度过高组织切片过于干燥，还没来得及染色就会发生脱片现象，若果不进行染色组织贴片可以在45度温箱中保存数小吋以上。2.染色染色要求是深浅适宜对比鲜明，染色不良主要与苏木素伊红的配置染色方法和室温有关，要掌握正确的染色液的配置方法，染色吋苏木素表面的氧化膜要捞浄，以免污染组织片，避免胞浆共染，染色模糊，关键在于苏木素染色后的分化，（常深染苏木素流水冲洗后用1%盐酸洒精分化）及蓝化过程，在蓝化过程结束后在显微镜下观察核着色情况，染色理想的切片在显微镜下是胞浆蓝红相映，鲜艳美丽，核浆对

8、比明显，核膜及核染色质颗粒明显清晰可见。3.脱水和封片，是病理技术的最后一关切片脱水应从低浓度的洒精到高浓度的洒精开始，低浓度的洒精比高浓度的酒精更容易脱水，如果切片带冇火量的水分就进入纯酒精容易造成切片带冇细小的水珠，较长吋间内不易去除，影响切片的透明度，二甲苯透明湿封。封片要掌握好树胶的浓度和量，浓度要调至适中，过浓易带奋气泡造成树胶太厚和盖玻片不平影响在显微镜下成像，太稀容易导致树胶外溢。总之要求病理技术人员责任心强，工作细致严谨，不