大鼠孤束核内h3 受体对哮喘发作时脑组织中fos蛋白表达的影响

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1、大鼠孤束核内H3受体对哮喘发作时脑组织中Fos蛋白表达的影响作者：胡春梅，董榕，刘保森，张晓红，季吉【关键词】哮喘　　Abstract:ObjectiveToinvestigatetheexpressionanddistributionoftheestrogenreceptors（ER）inthelungofmalerats.MethodsTheexpressionsofER.αmRNAandER.βmRNAinlungtissueserasechainreaction（RT-PCR），andER.βprotEininlungmunohistochemistry.Re

2、sultsAsidefromRNA，lungtissueshooderateexpressionofER.βmRNA.ThepositiveER.βimmunoreac-tivitynarepithelium，intermediatecells，basalcells，smoothmusclecellsoflungtissueandinpulmo-naryvascularsmoothmusclecells，endothelialcells.ConclusionER.βisdistributedinlungtissueofmalerats.　　Keymunohistoch

3、emistry;rats［摘要］目的:探讨大鼠孤束核（NTS）内组胺H3受体对哮喘发作时大脑Fos蛋白表达的影响及其意义。方法:取健康雄性SD大鼠制备哮喘模型并诱发哮喘发作，采用中枢立体定位及微量注射技术，分3组分别在NTS内微量注射无菌生理盐水、H3受体激动剂R.α.methylhistamine（RMHA）以及H3受体拮抗剂thioperamide（Thio）加RMHA，用SABC免疫组织化学方法测定大鼠哮喘急性发作后1hFos蛋白在丘脑至延髓平面各核团的分布情况。结果:与哮喘组相比，哮喘大鼠NTS内微量注射1μgRMHA，丘脑室旁核、下丘脑室旁核、室周核、NTS

4、等核团Fos蛋白表达减少，阳性细胞数降低，差异有显著性（P<0.01）;而用Thio5μg预处理则可拮抗RMHA的上述效应。结论:NTS内H3受体可能通过丘脑室旁核、下丘脑室旁核和室周核等脑区相关神经元参与对哮喘的神经调控，从而可能抑制哮喘发作。　　［关键词］大鼠;孤束核;H3受体;哮喘;Fos蛋白;表达　　支气管哮喘是一种常见的气道慢性变态反应性炎症，发病机制非常复杂，其中涉及多种炎性细胞和炎性介质，目前已证实c-fos参与了气道炎症反应。c-fos是一种即刻早期基因，在生理状态下即有低水平表达，调控着多种细胞的生长和分化，参与重要脑功能活动的信号转导和调控过

5、程，已被公认为脑功能活动形态学定位标记物之一［1］。本研究拟在大鼠孤束核（nucleustractussolitarius，NTS）内微量注射H3受体激动剂（R.α.methylhistamine，RMHA），用Fos蛋白抗体免疫组织化学方法检测丘脑至延髓平面各核团Fos蛋白的表达情况，初步探讨NTS内H3受体可能通过哪些脑区神经元来调控大鼠哮喘发作时的呼吸运动，从而为揭示哮喘发病机制和开发有效的抗哮喘药物提供实验依据。　　1材料和方法　　1.1哮喘模型制备　　雄性成年SD大鼠28只，体重250～300g，由东南大学医学院实验动物中心提供，在安静、温暖（18～25℃）

6、、避强光、明暗周期为10.14h的实验室预饲养1周后，随机取24只大鼠分成哮喘模型组（n=18）和生理盐水（NS）对照组（NS组，n=6）。实验第1天，每只模型组大鼠腹腔注射用卵蛋白（OVA）粉末100mg、氢氧化铝干粉100mg、灭活的百日咳杆菌5×109个配成的混悬液1ml1次，自第15天开始用超声雾化器给大鼠雾化吸入1%OVANS溶液（2～3ml・min-1，颗粒直径≤5μm），每天1次，每次均以哮喘症状出现（烦躁不安、呼吸急促、用力呼吸、呼吸困难、喘息、腹肌明显收缩、咳嗽等）作为指标，连续3d。NS组大鼠在致敏和吸入激发阶段均以NS代替OVA混悬

7、液，且吸入时间为同批哮喘模型组鼠最长诱喘时间。　　1.2核团定位和给药方法　　模型大鼠乌拉坦1g・kg-1腹腔注射麻醉后，将鼠头固定于立体定位仪上，参照Paxinons-HA（Sigma公司）临用前用无菌NS配制成1μg・μl-1和2μg・μl-1;H3受体拮抗剂thioperamide（Thio，Sigma公司）用无菌NS新鲜配制成10μg・μl-1，pH7.2～7.4，低温保存，注射前置于37℃水浴箱中加温。实验结束后用相同给药法在原点注射等体积美蓝后，将大鼠头浸泡在10%的甲醛液内，7d后