秦艽水煎液对小鼠急性肝损伤肿瘤坏死因子

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1、秦艽水煎液对小鼠急性肝损伤肿瘤坏死因子作者：苏晓聆，李福安，魏全嘉，杨林林【摘要】目的研究秦艽两个品种大叶秦艽和麻花秦艽水煎液对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护机制。方法40只昆明种小鼠完全随机分成4组：空白组、模型组、大叶秦艽水煎液组、麻花秦艽水煎液组。空白组及模型组给予生理盐水灌胃(4g/kg)，药物组给予相应药物水煎液灌胃(4g/kg)，连续灌胃7d后药物组与模型组采用10%四氯化碳花生油溶液(10ml/kg)腹腔注射造成急性肝损伤模型24h后采集全部血样，测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的含量。结果药物组与模型组相比

2、较，ALT与TNF-α水平降低(P<0.05)，而IL-10表达的水平则升高(P<0.05)，而药物组之间比较则没有显著性差异(P>0.05)。结论秦艽可增强四氯化碳损伤的肝组织中IL-10的表达,IL-10是介导秦艽保肝效应的重要细胞因子。而秦艽两个品种大叶秦艽和麻花秦艽在这一过程中产生的作用是没有差异的。【关键词】急性肝损伤;大叶秦艽;麻花秦艽;肿瘤坏死因子-α;白细胞介素-10秦艽为龙胆科龙胆属多年生草本植物秦艽(亦称大叶秦艽)GentianamacrophyllaPal1.、麻花秦艽G.stramineaMaxim.、粗茎秦艽G.crassicaulisDuthi

3、eexBurk.和小秦艽G.dahuricaFisch.的干燥根[1]，始载于《神农本草经》,列为中品，味苦、平，具有祛风湿、清湿热、止痹痛之功效。《本草纲目》用单味秦艽来治疗黄疸。药理研究表明，秦艽提取物龙胆苦苷具有抗肝损伤作用[2，3]，近年来许多研究结果提示，肿瘤坏死因子(Tumornecrosisfactor，TNF-α)和白细胞介素-10(Interleukin，IL-10)的升高可反映出局部和全身感染的存在，TNF-α水平的高低与疾病严重程度呈正相关，而IL-10则产生抗感染作用[4，5]，因此实验通过观察秦艽两个品种大叶秦艽和麻花秦艽的水煎液对四氯化碳(CCl4)腹腔注射诱导

4、的小鼠急性肝损伤血清中TNF-α、IL-10表达水平的影响，来探讨秦艽抗肝损伤作用的机制。　　1材料与方法　　1.1药物的制备　精密称取干燥的大叶秦艽和麻花秦艽各100g，分别加水1000ml浸泡30min，然后在电热套上煮沸，文火煎煮30min，把煎煮液过滤，在药渣里加水1000ml，再用同样的方法煎煮2遍，把3次的滤液混合，于旋转蒸发器中蒸发浓缩至1g生药/ml，4℃冰箱保存。药物经青海大学医学院中医教研室魏全嘉教授鉴定。　　1.2动物40只普通级昆明种小鼠，雌雄各半，体质量(22.60±1.73)g，由青海省实验动物中心提供。　　1.3观测指标及试剂盒观测指标为丙氨酸氨基转移酶(AL

5、T)，TNF-α，IL-10。试剂盒由上海沪尚生物有限公司提供，编号分别为E0207m，E0133m，E0056m。　　1.4仪器MH-2000型电子调温电热套、RE-52AA型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)、TGL-16G型台式离心机、美国宝特ELX-800酶标仪。　　1.5方法40只昆明种小鼠完全随机分成4组：空白组(10只)、模型组(10只)、大叶秦艽水煎液组(DY组，10只)、麻花秦艽水煎液组(MH组，10只)。空白组及模型组连续给小鼠灌生理盐水7d(4g/kg)，两个药物组连续给小鼠灌胃7d(4g/kg)，灌胃7d后药物组及模型组采用10%CCl4花生油溶液(10ml/kg)腹

6、腔注射造成急性肝损伤模型24h后采集血样，在室温放置2h后以3000r/min离心10min分离血清，于4℃冰箱保存(模型组造模后死亡1只)。按照试剂盒说明测定小鼠血清TNF-α、IL-10、ALT的含量。　　1.6统计方法采用统计软件SPSS17.0进行数据处理。结果用±s表示，显著性检验用单因素方差分析，两组间比较采用LSD-t检验。检验水准α=0.05。　　2结果　　2.1秦艽水煎液对CCl4所致小鼠肝损伤血清ALT的影响结果见表1。从表1可见模型组小鼠血清ALT明显升高(与空白组比较P<0.05)。DY组和MH组均能使血清ALT表达水平下降。DY组与MH组与模型组比较具有显著

7、性差异(P<0.05)，DY组、MH组比较没有显著性差异(P>0.05)。表1秦艽水煎液对CCl4所致小鼠肝损伤血清ALT的影响与空白组比较，△P<0.05;与模型组比较，▲P<0.05　　2.2秦艽水煎液对CCl4所致小鼠肝损伤血清TNF-α，IL-10的影响结果见表2。从表2可见模型组小鼠血清TNF-α升高明显，DY组及MH组血清TNF-α表达水平下降,而血清IL-10表达水平在模型组有所上调