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时间:2018-10-31
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1、探析肥胖对哮喘大鼠炎症介质的影响(丹阳市人民医院江苏丹阳212300)【摘要】目的:通过分析研究肥胖哮喘的动物模型的发病情况与介质变化,探究哮喘发病中肥胖起的作用。方法:随机将30只雄性大鼠分成A组(即“肥胖哮喘组”)、B组(即“哮喘组”)和C组(对照组),每组10只。A组大鼠用高脂饲料进行喂养,B、C组则用普通饲料进行喂养。A组大鼠和B组大鼠进行腹腔注射,两周后进行雾化吸入OVA,构建哮喘模型。用肺组织进行病理切片,并用免疫组化的检测方法测定肺组织中的TNF-α水平,应用ELISA双抗体夹心法检测IL-8水平。结果:与B、C两组相比,A组
2、大鼠的气道壁明显增厚、炎症细胞浸润度较高,肺组织肿瘤坏死因子-α水平(24%±4%)明显比B组(14%±5%}和C组(8%±3%)高(卩&比;0.05},IL-8水平[33.15±7.02)ng/L-l)]比B组[(23.82±2.34ng/L-l)]与C组C(16.78±4.19)ng/L-1]高(P<0.05)。结论:肥胖能够影响哮喘发作的严重程度和部分哮喘因子含量。【关键词】肥胖;哮喘;TNF-α水平;炎症【中图分类号】R965【文献
3、标识码】A【文章编号】1007-8231(2016)12-0245-02近年来,哮喘的发生与发展在很大程度上都与肥胖有关,肥胖这一危险的哮喘发病因素逐渐得到重视。肥胖是因为食物的摄入量过多或者是机体代谢发生改变所造成的体内脂肪聚积,导致人体体重增长过度而引起的。目前,医学界认为哮喘病的发病有很多炎性因子参与其中,同时也在一定程度上影响了肥胖的发病[1]。通过对比不同体重的大鼠参加哮喘发病的IL-8水平、TNF-α水平与组织病理学上的改变,研究在哮喘中肥胖的影响机制。现将结果报道如下。1.资料与方法1.1材料与试剂实验的试剂包括大鼠IL-8酶
4、联免疫试剂盒、卵清蛋白、大鼠TNF-α抗体以及PBS缓冲液,器材包括酶联分析仪、不锈钢高压锅、高频雾化器和光学显微镜,以及37°C恒温箱。1.2方法随机将30只雄性大鼠分为肥胖哮喘组、哮喘组与对照组,每组各10只。A组用高脂饲料进行饲养,并建立肥胖模型,B组和C组则用普通饲料进行饲养,每周测量一次身长和体重,并将测量的数据记录下来。12周后,A组大鼠的身长为(26.7±5.2)B组和C组为(27.6±4.3)A组与B、C两组间的差异无统计学意义;体重A组为(399±36)g,B、C组为(301&pl
5、usmn;33)g,A组和B、C两组差异具有统计学意义(P<0.05),A组大鼠的平均体重高于B、C两组20%,达到肥胖标准。哮喘模型的制作.•A组和B组每只人鼠的腹腔注射腹腔注射10毫兑卵清蛋白、10毫克氢氧化铝、1毫升生理盐水所配置的悬浊液,C组的大鼠则每天注射1毫升生理盐水,第10天重复一次;从第14天起,A组和B组用1%是卵清蛋闩雾化吸入发敏,每次20分钟,C组则用生理盐水进行雾化吸入,连续进行七天。观察三组的临床症状。1.3病理学检测杀死大鼠并将其右肺的下叶组织取出,保存于福尔马林溶液中,脱水、包埋、切片、烤片,并染色将其做成病理切片,通过光
6、镜观察气道壁的变化情况与炎症的细胞浸润状况。1.4免疫组化测定取出人鼠右肺的下叶组织,免疫组化的方法检测这三组的人鼠肺组织中的TNF-α情况。1.5检测血浆IL-8的水平在大鼠的心脏处取3毫升血,并立刻放在EFTA抗凝采血管中,避免血液样本被污染,离心5分钟留取血浆,并用ELISA双抗体夹心法测定这3组大鼠的血浆IL-8含量,严格规范操作方法。1.6统计学方法对搜集的数据用SPSS13.0统计软件进行统计和分析,采用F检验法比较各组指标变化情况,差异具有统计学意义(P<0.05)。1.结果2.1发病症状对比建立好动物哮喘模型后,与B组相比,
7、A组大鼠的哮喘发作吋,躁动、气促、和大小便失禁等情况比较明显,C组大鼠则无明显症状。2.2病理学测定结果比较HE染色结果表明,与B、C两组大鼠的检测结果相比,A组大鼠的肺组织的气道壁明显增厚、炎症细胞的浸润程度较高。2.3免疫组化测定结果对比免疫组化的测定结果用肿瘤坏死因子-α水平在肺组织中占的总体比例表示,A组为24%±4%、B组为14%±5%、C组为8%±3%,A组明显高于B组和C组的检测结果(P<0.05)。2.4血浆IL-8的检测结果比较A组的IL-8水平[33.15±7.02
8、)ng/L-l)]明显高于B组[(23.82±2.34ng/L-l)]、C组[(
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