沙利度胺对于m7细胞作用的实验研究

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1、沙利度胺对于M7细胞作用的实验研宄冯林泸州医学院附属医院血液科四川泸州646000【摘要】目的：研究沙利度胺对于M7细胞（巨核细胞白血病细胞）的作用。方法：用Sigma公司生产的沙利度胺原料药。以0.1%DMSO（二甲基亚砜）为阴性对照组，以M7细胞为空白组，以不同浓度的沙利度胺作用于M7细胞,用CCK-8方法（细胞计数试剂盒方法）观察不同浓度不同时间沙利度胺对于M7细胞的增值抑制作用；以不同浓度沙利度胺分别作用M7细胞24h,48h,72h后,用ELISA方法检测上清液中VEGF（血管内皮生长因子）的浓度；以不同浓度沙利度胺分别作用M7细胞24h,48h,72h后，经HE及DAP

2、I（二脒基苯基吲哚）染色后，用光学显微镜及荧光显微镜观察M7细胞形态变化，并应用统计学分析实验结果。结果：沙利度胺可明显抑制M7细胞分泌VEGF，并且抑制作用随着沙利度胺浓度及作用时间而增强；在CCK-8实验中，各组M7细胞与空白组相比，发现沙利度胺对M7细胞无明显抑制作用；光学显微镜观察不同时间段不同组，各组M7细胞与空白组相比较，细胞生长较好，呈圆形，细胞核大，核膜清晰。荧光显微镜下，未见明显凋亡小体。结论：1.沙利度胺能够明显抑制M7细胞分泌VEGF,并且呈时间浓度依赖性。2.沙利度胺对于M7细胞没有明显抗增殖效应及诱导其凋亡的作用。【关键词】沙利度胺；VEGF；M7细胞；凋

3、亡小体；DAPI染色【中图分类号】R52.5【文献标识码】B【文章编号】1674-8999（2015）9-0566-02[Abstract]Objective：ToresearchontheimpactofthalidomideonM7cellline.Methods：ThalidomideusedascrudedrugwasboughtfromSigmacompany.Take0.1%DMSOasthenegetivecontrolgroup,andM7cellsasblankgroup,totreatM7cellwiththalidomideofdifferentconcent

4、rationandchecktheproliferativeinhibitionrateofM7cellbyCCK-8;totreatM7cellwiththalidomideofdifferentconcentrationfor24hr,48hrand72hrrespectivelyandchecktheVEGFconcentrationofsupernatantbyElisa;totreatM7cellwiththalidomideofdifferentconcentrationfor24hr,48hrand72hrrespectivelyandchecktheformsand

5、apoptoticstateofM7cellsbylightmicroscopeandfluorescentmicroscopeandanalyzetheexperimentresultsbystatistics.Results：ThalidomidecanremarkablelyinhibittheVEGFsecretedbyM7cellandtheinhibitionincreasesasthetimeandconcentrationgoby.InCCK-8test,tocompareeachsubjectgroupwithblankgroup,wefindthalidomid

6、ehasnoremarkableinhibitoryactiononM7cell.Tocompareeachsubjectgroupofdifferenttimeswithblankgroupbylightmicroscopeandfluorescentmicroscope,wefindcellsgrowwellwithroundshape,largenucleusandlimpidnuclearmembranewithHEstainingandthereisnoapparenteapoptoticbodywithDAPIstaining.Discussion：l.Thalidom

7、idecanremarkablelyinhibitVEGFsecretionbyM7cell,andtheinhibitionistimeandconcentrationdependent.2.Thalidomidehasnonotableanti-proliferativeandapoptosis-inducedeffectsonM7cell.【Keywords】ThalidomideVEGFM7cellApoptiticbodyDAPIstaining急性巨核细胞