缺氧条件下a549细胞促进huvec迁移及血管形成

《缺氧条件下a549细胞促进huvec迁移及血管形成》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、原创性声明MIHIllllllllllllllllllll((Ir(1llJfY2197166本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：朔飞精学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部

2、门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。硕士学位论文中文摘要摘要研究目的：本研究旨在通过体外建立A549缺氧模型模拟体内肺癌的缺氧环境，直观观察缺氧条件下A549细胞促进人脐静脉内皮细胞(HUVEC)迁移、伪足形成及血管形成情况，揭示了体内肺癌组织内的缺氧环境与内皮细胞迁移、伪足形成、血管形成的关系，是肺癌血管生成过程中的

3、重要环节。实验方法：A549细胞在不同氧浓度(21％、2％、o％)条件下培养24小时后，通过倒置相差显微镜观察A549细胞形态、MTT法检测A549细胞增殖、免疫细胞化学技术检测A549细胞内HIF．1a蛋白量，并通过比较各组实验结果，来确定缺氧模型是否建立成功；随后取常氧组、缺氧组的A549细胞上清液按不同的浓度(50ul／ml、100ul／ml、150ul／m1)作用于HUVEC24小时后，对照组用培养液代替，采用细胞划痕试验方法比较各组HUVEC在不同浓度梯度下的迁移情况；然后根据细胞划痕实验结果，将各组细胞

4、迁移的最佳上清液浓度作用于HUVEC后，采用微丝绿色荧光染色方法来观察HUVEC的伪足形成，采用体外HUVEC三维培养技术在倒置相差显微镜下观察各组HUVEC的血管形成情况，并通过计数每视野下管腔样血管结构的数量对各组实验结构进行比较。实验结果：1缺氧对A549细胞生长的影响：1)与常氧组比较，缺氧组A549T硕士学位论文中文摘要细胞数目增多，贴壁生长良好，部分细胞形态不规则，可见多个伪足形成(提示：缺氧有利于A549细胞侵袭转移)，而无氧组A549细胞数目明显减少，细胞体积缩小，部分细胞形态消失，核质浓缩，可见少

5、数细胞漂浮；2)与常氧组比较，缺氧组的OD值升高(P

6、P

7、要关键词A549细胞，HUVEC，迁移，伪足，三维培养技术，缺氧ABSTRACTObjective：TheaimofthisstudyistoobservethatA549cellsunderhypoxicconditionspromotehumanumbilicalveinendothelialcells"m'ation．oseudooodformaticandvascularformat"throughmigrationpseudopodtormationanavascularIormalionmrougn，e

8、stablishinghypoxiamodeloftheA549cellsinvitro，whichrevealstherelationshipduringhyp-oxia，endothelialcellmigration，pseudopodformationandvascularformation，andisanimportantpartofangloge