meg3长链非编码rna在胃癌组织中的表达及意义

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1、MEG3长链非编码RNA在胃癌组织中的表达及意义(湖北省第三人民医院肿瘤科；湖北武汉430030)摘要：目的：检测胃癌中母系印记基因3(MEG3)i＜链非编码RNA的表达，探讨其与肿瘤发展的关系。方法应用实时荧光定量PCR的方法检测87例胃癌及其配对癌旁正常胃粘膜组织中MEG3的表达，统计学分析其表达与肿瘤临床分期的关系。结果统计学分析表明胃癌组织与配对癌旁正常组织比较MEG表达都有显著降低(P<0.01)。结论MEG3在胃癌发生发展过程中表达有明显降低，与胃癌的发生有密切的关系。关键词：胃癌；长链非编码RNA;MEG3ExpressionofMEG3longn

2、on-codingRNAinGastricCarcinomasandItsClinicalSignificancy*LIULi,WEIWu-jie,LILi,SUNJian-haiTheDepartmentofOncology,Thethirdpeople'sHospitalofHubeiProvincel,Wuhan430030,HubeiProvince,China[Abstract]:Objective:ToexaminetheMEG3IncRNAexpressioningastriccarcinomas(GC)andcorrelateitwithpatient

3、clinicalstatus.Methods:ExpressionlevelsofMEG3IncRNAwerequantitatedwithstem-loopquantitativereversetranscription-PCRin87GCpatientsandpairedadjacentnormaltissues(ANTs),andcorrelatedtothepathoclinicalstatusofthepatients.Results:ExpressionofMEG3IncRNAwasmarkedlydecreasedinGCtissuescomparedw

4、ithANTs(P<0.01).Conclusion:ExpressionofMEG3IncRNAwasattenuatedinGCsandcorrelatedcloselywithcancerprogression.[Keywords]:gastriccarcinoma;longnon-codingRNA;MEG3.1八—刖g胃痛(gastriccarcinoma,GC)是发生在消化道的恶性肿榴，近年来在中国发病率排名第一［1】。引起胃癌发生的因素很多，一些最新的研究表明某些长链非编码RNA(longnon-codingRNA,lncRNA)的表达异常可能参与

5、了胃癌的发生发展过程［2】。IncRNA是一类长度在200-100000nt之间，不编码蛋白质的分子。母系表达基因3(materallyexpressedgene3，MEG3)是第一个被发现初忡瘤抑制功能的IncRNA,表达于多种正常组织中，然而在脑癌及一些肿瘤细胞株中不表达［3］，在中国人群胃癌中的表达目前尚无报道。本研究应用荧光定量PCR方法在收集的胃癌组织和配对正常组织中检测MEG3的表达，并分析其与肿瘤发生的关系。1材料与方法1.1实验材料1.2.1临床样本采集87例胃癌标本均取自2012年9月~2015年1月湖北省中山医院普外科进行手术治疗的患者，所有患者己

6、了解样本采集意义并签署知情同意书。病理均确诊为胃癌；既往无免疫缺陷、自身免疫疾病、肝炎、HIV和其它已知感染性疾病；所有病例均为腺癌，其他病理类型已排除。每一例样本都含原发灶和距癌缘5cm以上的癌旁正常组织。样本采集后立即放入液氮，后置于RNA保存液中低温贮藏。1.2.2试剂和仪器mirVana?miRNAIsolationKitcat#1560(Ambion)、M-MLV逆转录酶和M-MLV5×buffer(Promega)>RNA酶抑制剂(鼎国｝、TaqDNA聚合酶及TaqmanMicroRNAAssay试剂盒(Takara)、dNTPs(Takara

7、)、常规试剂由中山医院中心实验室提供。Real-timePCR仪(Bio-radIcycler)、普通PCR仪(MDResearch)、低温超速离心机和超低温冰箱等由武汉大学医学院生物化学与分子生物学实验室提供。1.2实验方法和步骤1.2.1总RNA提取和纯化使用TotalRNAIsolationKit(Ambion)提取、纯化储存于RNA保存液中的87例胃癌标本、配对癌旁组织标本中的总RNA,后溶于DEPC水中，立刻保存于-70°C低温冰箱，详细提取步骤严格按照产品说明书执行。1.2.2逆转录和实吋荧光定量PCR首先将提取的总RNA逆转录成cDNA