岛津lc2010ac型高效液相操作规程

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1、岛津LC-2010C型高效液相操作规程1、目的规范岛津LC-2010C型高效液相色谱仪的使用。2、范围适用于岛津LC-2010C型高效液相色谱仪的使用。3、规程3.1系统组成本系统由容器箱、自动进样器、检测部、输液部、柱温箱、系统控制器、Easy3000工作站和电脑等组成。3.2准备3.2.1准备所需的流动相,用合适的0.45μm滤膜过滤,超声脱气至少20min。3.2.2根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱(注意方向)。3.2.3配制样品和标准溶液(也可在平衡系统时配制),用0.45μm滤膜过滤。3.2.4检查仪器

2、各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。3.3开机接通电源,按下系统控制器面板上的电源开关上托画面上显示要输入LoginPass-ID-No的对话框,输入00000后,按[OK]显示Menu画面,选择Method画面,在Method画面进行相关参数设定,然后打开电脑显示器、主机,最后打开色谱工作站。3.4参数设定3.4.1波长设定在Method画面上,将光标置于UV-VIS检测器波长设定的栏内,用数字键输入所需波长值,按[Enter]键确认。3.4.2流速设定在Method画面上,将光标置于流量设定的栏内,用

3、数字键输入所需的流量(柱在线时流量一般不超过1ml/min),按[Enter]键确认。3.4.3流动相比例设定在Method画面上,将光标置于流动相混合比率设定的栏内,在A-D上,用数字键输入所需流动相的混合比率,按[Enter]键确认。3.4.1柱温设定在Method画面上,将光标置于柱温箱温度设定栏,用数字键输入柱温箱所需的温度,按[Enter]键确认。3.5更换流动相并排气泡3.5.1将管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中;3.5.2逆时针转动泵的排液阀180°,打开排液阀;3.5.3在Method画

4、面上,按[purge]键显示清洗设定的上托画面,pump键旁的绿指示灯亮,输液泵开始工作。3.5.4依次按下使用的流动相通道和冲洗液通道的功能键,即流路A、流路B、流路C、流路D及自动进样的冲洗液,泵大约以8ml/min的流速冲洗,清洗完成后自动停止。3.5.5将排液阀顺时针旋转到底,关闭排液阀。3.5.6如管路中仍有气泡,则重复以上操作直至气泡排尽。3.5.7如按以上方法不能排尽气泡,从柱入口处拆下连接管,放入废液瓶中,设流速为5ml/min,按[pump]键,冲洗3min后再按[pump]键停泵,重新接上柱并将

5、流速重设为规定值。3.6平衡系统3.6.1按《Easy3000色谱数据工作站操作规程》打开“Easy3000色谱工作站”软件,输入实验信息并设定各项方法参数后,等待系统平衡。3.6.2等度洗脱方式3.6.2.1按泵的[pump]键,泵启动,pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统,一般最少需6倍柱体积(约30min)的流动相。3.6.2.2检查各管路连接处是否漏液,如漏液应予以排除。3.6.2.3观察泵控制屏幕上的压力值,压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡,按3.5.6操作。3.

6、6.2.4观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min,噪声为<0.001mV时,可认为系统已达到平衡状态,可以进样。3.6.3梯度洗脱方式3.6.3.1以检验方法规定的梯度初始条件,按3.6.2项下方法平衡系统。3.6.3.2在进样前运行1~2次空白梯度。方法:具体操作详见LC-2010A操作说明书34页3.4.6梯度洗脱的设定。3.7进样3.7.1进样前按检测器[zero]键调零,按软件中[零点校正]按钮校正基线零点。3.7.2按下系统控制器面板上的Run键,系统自动进样。3.8清洗柱及进样系统和关机

7、3.8.1数据采集完毕后,关闭检测器,继续以工作流动相冲洗20min后,(如流动相含缓冲盐,换为不含缓冲盐的同比例流动相在冲洗20min),再换用纯水冲洗系统及色谱柱至少60min,最后用甲醇或乙腈冲洗至少30min。3.8.2冲洗完柱后,将整个流路都置于有机溶剂中,按3.5.4清洗整个流路及进样系统。3.8.3清洗完成后,先将流量降到0,关闭电源开关。3.8.4每次实验完毕,均需更换循环瓶中的水。3.8.5认真填写仪器使用记录。1仪器组成与开机1.1本仪器由Class-VP工作站、在线脱气机、输液泵、自动进样器、

8、柱温箱和检测器等部件组成。各部分的操作均可由工作站或液晶面板控制完成。1.2分别打开计算机、LC-2010A/C高效液相色谱仪的电源开关。1.3仪器约需3min时间完成自检过程,此时双击【Class-VP】快捷方式图标后,双击【Instrumentl】可进入联机状态;双击【OfflineProcessing】可进入脱机状态(联机状态下可实现计算机对仪器的操纵

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