讲义土壤中细菌的分离与计数（3）ppt课件

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1、专题二微生物的培养http://sw.dgzx.net2006-06-02实践2:分离土壤中的分解尿素的细菌1、培养基的选择？http://sw.dgzx.net2006-06-02本培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素为氮源，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以，能够选择出分解尿素的微生物。http://sw.dgzx.net2006-06-02实践2:分离土壤中的分解尿素的细菌在本课题提供的选择培养基的配方中，尿素是培养基中的惟一氮源，因此，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长

2、。但实际上，微生物的培养是一个非常复杂的问题，有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖，因此能够在选择培养基上生长的微生物不一定是所需要的微生物，还需要进一步的验证。http://sw.dgzx.net2006-06-02选择培养基允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。http://sw.dgzx.net2006-06-02实践3:分离并计算土壤中的分解尿素的细菌的数目http://sw.dgzx.net2006-06-02统计菌落数目的理论依据是：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来

3、源于样品稀释液中的一个活菌。因此，恰当的稀释度是成功地统计菌落数目的关键。为了保证结果准确，通常将几个稀释度下的菌液都涂布在平板上，培养后再选择菌落数在30～300的平板进行计数。http://sw.dgzx.net2006-06-02第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复组，因此结果不具有说服力。第二位同学考虑到设置重复组的问题，涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另2个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。http://sw.dgzx.net2006-06-02A同学的结果与其他同学不

4、同，可能的解释有两种。一是由于土样不同，二是由于培养基污染或操作失误。究竟是哪个原因，可以通过实验来证明。实验方案有两种。一种方案是可以由其他同学用与A同学一样的土样进行实验，如果结果与A同学一致，则证明A无误；如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或培养基的配制有问题。另一种方案是将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。http://sw.dgzx.net2006-06-02（一）培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落对照的培养皿在培养过程中没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。牛肉膏培养

5、基的菌落数目明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些菌落。http://sw.dgzx.net2006-06-02（二）样品的稀释操作是否成功如果得到了2个或2个以上菌落数目在30～300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数。http://sw.dgzx.net2006-06-02（一）旁栏思考题1.想一想，如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？答：统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后按课本旁栏的公式进行计算。http://sw.dgzx.net2006-06-022.为

6、什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？答：这是因为土壤中各类微生物的数量（单位：株/kg）是不同的，例如在干旱土壤中的上层样本中：好氧及兼性厌氧细菌数约为2185万，放线菌数约为477万，霉菌数约为23.1万。因此，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。http://sw.dgzx.net2006-06-02（二）练习2.提示：反刍动物的瘤胃中含有大量的微生物，其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多为厌氧菌，

7、接触空气后会死亡，因此分离其中能分解尿素的微生物除了需要准备选择培养基外，还应参照厌氧菌的培养方法进行实验设计。http://sw.dgzx.net2006-06-02实践3:分离并计算土壤中的分解尿素的细菌的数目1、如何对细菌进行计数？http://sw.dgzx.net2006-06-02实践3:分离并计算土壤中的分解尿素的细菌的数目1、如何对细菌进行计数？http://sw.dgzx.net2006-06-02实践3:分离并计算土壤中的分解尿素的细菌的数目1、如何对细菌进行计数？http://sw.dgzx.net2006-06-02实验步骤：土

8、壤取样制备培养基细菌的计数微生物的培养与观察http://sw.dgzx.net2006-06