专业论文读书报告淡水褶纹冠蚌溶菌酶的基因识别和重组蛋白课件

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1、专业论文读书报告报告人：程玲慧江西师范大学生命科学学院GeneidentificationandrecombinantproteinofalysozymefromfreshwatermusselCristariaplicata淡水褶纹冠蚌溶菌酶的基因识别和重组蛋白摘要溶菌酶是双壳类动物中固有的免疫反应中抗细菌感染的重要蛋白质，并作为消化酵素提供营养。CpLYZ1cDNA序列的全长是763bp。CpLYZ1可以被检测到在所有被审查的组织中，但肝胰腺中有最高表达水平。在嗜水气单胞菌侵染后，血细胞、肝胰脏和鳃中CpLYZ1的表达水平显著增加。血细胞CpLYZ1表达水平在被感染后的6

2、h~24h又急剧下降,在48h大大增加。而在肝胰腺和鳃中达到最高水平分别需24h、48h。CpLYZ1最适pH值和温度分别为5.5和50℃。对大肠埃希氏大肠杆菌、嗜水气单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、链球菌sp和表皮葡萄球菌，重组CpLYZ1具有溶菌活力。关键词：淡水褶纹冠蚌溶菌酶基因克隆基因重组蛋白一、引言溶菌酶是很多种生物无处不在的酶。这种酶可以切断细菌细胞壁的两个氨基糖、N-乙酰胞壁酸与N-乙酰氨基葡萄糖之间形成的糖苷键从而导致细胞溶解溶菌酶的主要生物作用是主体防御，这种酶可以作为抗菌和免疫调节剂。同时，溶菌酶被视为一些动物的重要消化酶，特别是对于过滤器式喂养的有机体

3、。在这项研究中主要要了解正常双壳类肝胰脏、鳃、血细胞等组织中cplyz1mRNA转录调控的表达模式。二、材料与方法实验动物和细菌的挑战RNA提取和cDNA合成扩增阳离子和内部CpLYZ1cDNA片段的克隆快速扩增cDNA末端（RACE）的阳离子序列分析嗜水气单胞菌入侵之后CpLYZ1mRNA的组织分布和时间表达重组表达载体的构建重组CpLYZ1的表达，纯化阳离子和复性溶菌酶活性测定重组CpLYZ1的抗菌谱三、结果CpLYZ1的cDNA序列同源性比较，系统发育分析的域结构CpLYZmRNA在不同组织中的分布嗜水气单胞菌入侵后CpLYZ1mRNA在血细胞、肝胰脏、鳃中的表达重组蛋

4、白的表达，纯化和复性温度和pH对重组cplyz1相关活性的影响重组cplyz1抗菌谱讨论溶菌酶是具有杀菌效果和免疫功能的效应分子。它有三个类型、c型、g型和i型。i-型溶菌酶基因表达模式对组织的变化无动于衷可，能表示它们在其进化过程中有不同的生物逻辑函数Glu35和Asp52是必不可少的两个酸性残留物的来保持c类型溶菌酶活性。在研究中，重组CpLYZ1显示广泛的对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抗菌活性。结果表明CpLYZ1拥有酶促和非酶抗菌活性。特别是病原体引起的水生动物疾病的水生动物有抗菌活性。我们推测非酶抗菌活性的CpLYZ1引起单螺旋肽，及其机制需要进一步清验证阳离子。