藤茶水溶性多糖的分离纯化及性质的研究

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1、X工艺技术目品科字2007,Vol.28,No.01151藤茶水溶性多糖的分离纯化及性质的研究罗祖友’，程超’，李伟‘，吴谋成2(1.湖北民族学院生物科学与技术学院，湖北恩施445000;2.华中农业大学食品科技学院，湖北武汉430070)摘要:经水提、醇沉、Sevag法脱蛋白的藤茶多糖(AGP)，通过DEAE-SephadexA-25和SephadexG-200柱层析，得到多糖AGP-3和AGP-4014PLC和SephadexG-200柱层析鉴定AGP-3和AGP-4为分子量相对均一的蛋白多糖，硫酸

2、一咔哇反应、考马斯亮蓝G-250反应均呈阳性。关键词:藤茶;多糖;分离;纯化:性质Isolation,PurificationandCharacterizationofWater-solublePolysaccharidesfromAmpelopsisgrossedentataLUOZu-you',CHENGChao',LIWei',WUMou-cheng2(1.SchoolofBiologicalScienceandTechnology,HubeiInstituteforNationalities,E

3、nshi445000,China;2.CollegeofFoodScienceandTechnology,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan430070,China)Abstract:PolysaccharidefromAmpelopsisgrossedentata(AGP)wasobtainedafterbeingextractedwithhotwater,precipitatedwithalcoholandremovedfreeproteinwithSevagm

4、ethod.AGPwasisolatedandpurifiedbyDEAE-SephadexA-25andSephadexG-200columnchromatography,twopurepolysaccharides(AGP-3andAGP-4)weregained.TheresultsofHPLCandSephadexG-200columnchromatographyillustratedthatbothAGP-3andAGP-4wereprotein-bondpolysaccharidswithc

5、omparativelyhomogenousmolecularweights.Also,thetwopolysaccharidswerecoloredbycoomassiebrilliantblueG-250andcarbazolereaction.Kevwords:AMDOODSiserossedentata;polvsaccharide:isolation:purification;characterization中图分类号:Q539文献标识码:A文章编号:1002-6630(2007)01-015

6、1-04藤茶，也称显齿蛇葡萄[Ampelopsisgrossedentata院新疆化学所生化试剂厂;考马斯亮蓝G-250、三氯(Hand-Mazz)W.T.Wang]，是我国特有的药食两用植物‘”。甲烷等均为国产分析纯产品;透析袋(D32)为Bromma公藤茶不仅含有丰富的生物活性成分一藤茶黄酮[2-31，也有司产品。较高含量的多糖「41。关于藤茶多糖的提取，国内外报道1.1.3主要仪器与设备不多。本研究在己确定的藤茶水溶性多糖提取工艺的基紫外可见分光光度计，UV-265FW,Shimadzu,础上，对

7、藤茶多糖作进一步的分离纯化与性质研究，以Japan;真空冷冻干燥机，扬子江蜂业公司冷冻干燥生期为更有效地利用藤茶资源和研究藤茶多糖生物活性提产线;旋转蒸发仪，BuchiRE111,Switzerland;高供参考。压液相色谱仪，Agilent1100,USA.1.2方法1材料与方法1.2.1藤茶多糖粗品的提取制备材料按前期研究优化的多糖提取工艺〔41，称取藤茶粗1.1.1藤茶原料:由鄂西藤茶公司提供，经粉碎过筛粉，经石油醚浸泡、回流除去色素、小分子糖等物质，后得藤茶粗粉，封装、备用。残渣晾干。以1:25

8、料水比于95℃水浴浸提2次，每次1.1.2主要试剂4h，得到多糖的浸提液，真空浓缩后，加入浓缩液3DEAE一SephadexA-25.SephadexG-200均为倍体积的95%EtOH，静置2h，收集沉淀，再复溶-Pharmacia(USA)产品;多糖标准品Pullulan系列，日醇沉一次，冷冻干燥，得到灰褐色的藤茶水溶性多糖粗品，以粗品重量相对原料计算多糖得率，约为7.0%一本东京化成公司产品;牛血清白蛋白(电泳纯)，中科收稿日期:20