高效液相色谱测定水解大豆中异黄酮方法研究

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1、维普资讯http://www.cqvip.com2006年第4期粮食与油脂19高效液相色谱测定水解大豆中异黄酮方法研究张晓波，吴岩。林红(黑龙江省农业科学院，哈尔滨150086)摘要：该研究建立大豆提取物中大豆并黄酮高效液相色谱测定方法，通过正交实验确立糖苷型大豆异黄酮转化为游离型大豆并黄酮最佳酸水解工艺条件：盐酸浓度为2．0mol／L，水解温度为80℃，水解时间为1．5h；采用Zorbax80AExtend．C184．6x150rnm4Ixm色谱柱。MeOH．1．8％冰乙酸水溶液(35：65，V／V)为流动相。MeOH35％~50％梯度洗脱，流速

2、1．0ml／min，检测波长为260nm等色谱条件下测定甙元含量，并通过换算因子计算大豆异黄酮含量。关键词：大豆异黄酮；糖苷型大豆异黄酮；酸水解；高效液相色谱法Study0nMethodofHydrolyzeIsoflavoneinSoybeanbyHPLCZHANGXiao-bo。WUYan。LINHong【HeilongjiangAcademyofAgriculturalSciences，Harbin150086，China)Abstract：AmethodondistillingisoflavoneinsoybeanbyHPLCisfound

3、inthisarticle．Bymeansoforthogonaltest，theconditionforhydrolyzingsoybeanisoflavonesglycosideintoisoflavonesaglyconwasoptimizedasfollows：2．0mol／Lhydrochloricacid，temperature80℃，timeofhydrolyze1．5hour，chromatogrampillarisZorbax80AExtend—C184．6x150mlTl4Ixm。flowliquidMeOH一1．8％(acet

4、icacid：wateris35：65，v／v)，MeOH35％～50％gradscleanoutflow—rateof1．0ml／min，wavelengh260nnl，accountsoflavoneinsoybeanbyconversiongene．KeyWords：soybeanisoflavone；soybeanisoflavoneglycoside；acidhydrolyzation；HPLC中图分类号：TS202．3文献标识码：A文章编号：1008-9578(2006)04-0019-03大豆异黄酮是大豆等豆科植物生长过程中形成本实验

5、对大豆提取物中异黄酮含量高效液相色一类次生代谢产物，在自然界中分布有限，在上世纪谱测定方法进行系统研究，进行大量试验把传统用甲90年代逐渐被受关注。大豆异黄酮是一类生物类黄醇或乙醇等有机溶剂提取法和盐酸水解法进行比较，酮，主要是指以3一苯并吡喃酮为母核化合物，迄今已并对样品前处理条件进行系统研究探讨，建立一套能从大豆中分离出9种异黄酮糖苷和3种相应糖苷配基准确定性和定量分析测定大豆异黄酮方法。(即游离异黄酮，也称苷元)，具有极大开发潜力。1试验材料与方法国外研究表明，大豆异黄酮具有明显生理活性，1．1仪器可广泛应用于食品、医药等业；药理学研究表明，

6、大豆Agilent1100高效液相色谱仪：DAD检测器：恒温异黄酮可作为雌性激素治疗代替品，可改善妇女更年水浴；旋混仪；超声波提取仪。期综合症，并具有降低血中胆固醇、防止骨质疏松及1．2试剂与材料抑制癌细胞生长作用。随着人们生活水平提高，对天大豆异黄酮标样：大豆甙(Daidzin，简写为D)，染然生物活性物质需求正逐渐增长，大豆异黄酮对人体料木甙(Genistin，简写为G)，大豆黄素(Daidzein，简写生理代谢有益调节作用及丰富大豆资源，为大豆异黄为De)，染料木素(Genistein，简写为Ge)，均购自Sigma酮开发利用展示广泛市场前景

7、。公司。大豆提取物中大豆异黄酮含量是产品质量关键甲醇：色谱纯试剂；乙醇：分析纯试剂；盐酸：优级指标之一，也是大豆异黄酮产品研究开发中首先必需纯试剂。水：自制，二次重蒸。解决问题，因此准确测定大豆及大豆提取物中大豆异标准溶液：准确称取标准品大豆甙，染料木甙，大黄酮含量对评价大豆品质和生产高含量大豆异黄酮豆黄素，染料木素各10mg，加入100ml容量瓶中，以产品工艺研究有着重大意义。目前，对大豆异黄酮测80％乙醇溶解，定容至刻度，作为标准储备液。定方法主要有比色法、纸色谱法、薄层色谱法、气相色1．3色谱条件谱法、HPLC法等。比色法干扰多，专一性差，测

8、定结果色谱柱：Zorbax80AExtend—C184．6x150mlTl4la,m：偏差较大，且需要较为复杂的样品前处理