食品中硫辛酸的测定(高效液相色谱测定方法)

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1、十一．食品中硫辛酸的测定(高效液相色谱测定方法)本方法适合食品中硫辛酸的测定本方法检测限：食品中硫辛酸为0.068%。（一）方法提要试样中的硫辛酸经提取后，在高效反相色谱C18柱分离，紫外检测器或二极管阵列检测器检测，外标法定量硫辛酸的含量。（二）仪器1.高效液相色谱仪带紫外检测器或二极管阵列检测器。2.超声清洗仪。3.天平（精确到0.0001g）。4.微孔滤膜（PVDF0.45μm）。（三）试剂1.色谱用水（Millipore纯水器制备）。2.甲醇（色谱纯）。3.乙腈（色谱纯）。4.0.005mol/mL磷酸二氢钾溶液：0.68g磷酸二氢钾（分析纯）加水至1000mL

2、，溶解混匀，用磷酸（分析纯）调pH值3.5，过微孔滤膜0.45μm，待用。5.流动相：乙腈＋甲醇＋磷酸溶液(0.005mol/mL)=15＋48+37（V+V+V）。6.硫辛酸对照品，Sigma公司(纯度99%)。7.硫辛酸标准溶液：精密称取硫辛酸对照品约0.0200g，移入100ml棕色容量瓶中，加入流动相超声溶解并用流动相定容，成浓度为200μg/mL的标准工作液。取标准工作液（200μg/mL）5.0mL用甲醇定容到10mL，成为浓度为100μg/mL的标准溶液。再取标准工作液（100μg/mL）5.0mL用甲醇定容到10mL，成为浓度为50μg/mL的标准溶液。

3、（四）测定步骤1.样品处理：称取均匀试样0.5g(精确到0.1mg)于50mL棕色容量瓶中，加入流动相至刻度，称定重量，超声30min，取出，冷却后再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀经0.45µm滤膜过滤，清液待分析。2.标准工作曲线制作。分别取10μL硫辛酸标准工作系列溶液（50μg/mL，100μg/mL，200μg/mL）进样分析，以测得的硫辛酸的峰面积，分别对硫辛酸2的浓度绘制标准曲线。3．色谱条件①色谱柱：DiamonsilC18液相色谱柱4.6mmi.d.×250mm,5µm。②流动相：乙腈＋甲醇＋磷酸溶液(0.005mol/mL)=15＋48+37（

4、V+V+V）。③流速：1mL/min。④柱温：35℃。⑤紫外检测波长：215nm。4.样品测定：取样品滤液10μL进液相色谱分离测定，根据色谱峰保留时间定性，外标峰面积法进行定量。（五）结果计算根据待测样品色谱峰面积，由标准回归方程式中得样液中硫辛酸含量，计算出样品中的含量。试样中苦杏仁苷含量按下式进行计算。X=式中：X——试样中硫辛酸含量，单位为克每一百克（g/100g）；c——样液的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；V——样品的定容体积，单位为毫升（mL）；m——样品的取样量，单位为克（g）；计算结果保留三位有效数字。（六）注释1.硫辛酸，化学名称为（±）-5-

5、[3-(1,2-二硫杂环戊烷)]-戊酸，分子式为C8H14O2S2。硫辛酸为白色结晶体，既溶于水又溶于脂肪类溶剂，极易溶于脂类溶剂中。硫辛酸是已知天然抗氧化剂中效果最强的一种，能够再生内源性抗氧化剂，被称为"抗氧化剂的抗氧化剂"，其抗氧化作用是非常突出的，有着很大的应用潜力。2.文中试剂如未注明规格，均指分析纯；所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。参考文献[1]孙靓,张守尧,张忠义,季爱民.HPLC法测定硫辛酸缓释片中主药的含量[J].中国药房，2008,19(19)：1501-1502.2