SNT0673-2011进出口肉及肉制品中盐霉毒素残留量检测方法酶联免疫法.pdf

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1、版权所有·禁止翻制、电子发售中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜０６７３—２０１１代替ＳＮ／Ｔ０６７３—１９９７进出口肉及肉制品中盐霉素残留量检测方法酶联免疫法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犛犪犾犻狀狅犿狔犮犻狀狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犿犲犪狋犪狀犱犿犲犪狋狆狉狅犱狌犮狋狊犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋—犈狀狕狔犿犲犾犻狀犽犲犱犻犿犿狌狀狅狊狅狉犫犲狀狋犪狊狊犪狔２０１１０２２５发布２０１１０７０１实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局版权所有·禁止翻制、电子发售中华人民共和

2、国出入境检验检疫行业标准进出口肉及肉制品中盐霉素残留量检测方法酶联免疫法ＳＮ／Ｔ０６７３—２０１１中国标准出版社出版北京复兴门外三里河北街１６号邮政编码：１０００４５网址ｗｗｗ．ｓｐｃ．ｎｅｔ．ｃｎ电话：６８５２３９４６６８５１７５４８中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本８８０×１２３０１／１６印张０．５字数９千字２０１１年６月第一版２０１１年６月第一次印刷印数１—１６００书号：１５５０６６·２２２１５８定价１４．００元犛犖／犜０６７３—２０１１版权所有·禁止翻制、电子发售前言本标准按照ＧＢ／Ｔ

3、１．１—２００９给出的规则起草。本标准代替ＳＮ／Ｔ０６７３—１９９７《出口肉及肉制品中盐霉素残留量检验方法滤纸片法》。本标准与ＳＮ／Ｔ０６７３—１９９７相比，主要技术变化如下：———将原标准的检测方法滤纸片法变更为酶联免疫法；———将原标准中文名称《出口肉及肉制品中盐霉素残留量检验方法滤纸片法》修订为《进出口肉及肉制品中盐霉素残留量检验方法酶联免疫法》；———修改了适用的范围；———删除了原标准的抽样内容。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局

4、，中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。本标准主要起草人：赵良娟、贺艳、孙哲平、张宏伟、郑文杰、赵宏、高旗利、候丽萍、闫煜。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：———ＳＮ０６７３—１９９７。Ⅰ犛犖／犜０６７３—２０１１版权所有·禁止翻制、电子发售进出口肉及肉制品中盐霉素残留量检测方法酶联免疫法１范围本标准规定了进出口肉及肉制品中盐霉素残留量的酶联免疫测定方法。本标准适用于进出口鸡肉中盐霉素残留量的检测，其他肉及肉制品可参照执行。２试剂和材料除另有规定外，所用化学试剂均为分析纯，或为更高级别。水为去离子

5、水。１）（参见附录Ａ）。２．１盐霉素酶联免疫定量测定试剂盒２．２甲醇。２．３氯化钠。２．４二氯甲烷。２．５氢氧化钠。２．６８％的氯化钠溶液：称取８．０ｇ氯化钠加去离子水溶解定容至１００ｍＬ。２．７甲醇８％氯化钠溶液：８０ｍＬ甲醇加入到２０ｍＬ８％的氯化钠溶液中混匀。２．８０．５ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠８％氯化钠溶液：称取２．０ｇ氢氧化钠加８％氯化钠溶液溶解定容至１００ｍＬ。２．９复溶工作液：用去离子水将２×浓缩复溶液按１∶１体积比进行稀释。４℃环境可保存１个月。２．１０洗涤工作液：用去离子水将２０×浓缩

6、洗涤液按１∶１９体积比进行稀释。４℃环境可保存１个月。２．１１盐霉素标准品：标准品纯度≥９８％。２．１２盐霉素标准品溶液的配制：准确称取适量的盐霉素标准品，用复溶工作液配制成１ｍｇ／ｍＬ标准贮备溶液，于４℃～８℃条件下保存。３仪器和设备３．１酶标仪：波长４５０ｎｍ。３．２匀浆机。３．３振荡器。３．４天平：量程２ｋｇ，感量０．１ｇ。３．５离心机：５０００犵。３．６氮气吹干仪。３．７洗板机。３．８微量加样器：２０μＬ、５０μＬ、１００μＬ、２００μＬ。３．９微量多通道加样器：５０μＬ、１００μＬ。１）给出

7、该信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对某一产品操作步骤的认可。如果其他产品的操作步骤有不同，需经实验评估后采用。１犛犖／犜０６７３—２０１１版权所有·禁止翻制、电子发售４试样的制备和保存４．１试样的制备从所取全部样品中取出有代表性样品约１ｋｇ，充分搅碎，混匀，采用四分法，将样品分成两等份，装入洁净容器，加封并做标识。４．２试样的保存试样放置－２０℃～－１８℃条件下保存。５测定方法５．１方法提要本方法的测定基础是间接竞争性酶联免疫反应，样本中的盐霉素与微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗盐霉素抗体，加入酶

8、标二抗后，用ＴＭＢ底物显色，样本吸光值与其所含盐霉素的含量成负相关，按绘制的校正曲线定量计算即可得出盐霉素的含量。５．２样品处理称取２．０ｇ试样均质物至离心管中，加入８ｍＬ甲醇８％氯化钠溶液，剧烈振荡５ｍｉｎ，４５００犵以上离心１０ｍｉｎ；移取２ｍＬ上清液加入４ｍＬ０．５ｍｏＬ／Ｌ氢氧化钠８％氯化钠溶液，混合均匀，再加入１０ｍＬ二氯甲烷，振荡５ｍｉｎ，４５００犵离心１０ｍｉｎ；除去上层，取下层５ｍＬ至试管中，于５０℃～６０℃水浴氮气吹干；用１ｍＬ复溶