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《Tob mRNA在结直肠癌组织表达的临床病理学意义.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、TobmRNA在结直肠癌组织表达的临床病理学意义作者：霍志斌，王淑霞，吴殿超，肖琦海，翟同善，周总光【关键词】结直肠癌 摘要：目的：研究TobmRNA在结直肠癌组织及其相应的癌旁正常组织的表达，探讨其在结直肠癌发生发展中的作用。方法：用荧光定量RT-PCR方法，检测38例结直肠癌标本及其相应的癌旁正常组织TobmRNA的表达。结果：38例癌组织TobmRNA表达高于癌旁正常组织（P<0.005）；TobmRNA表达随着Dukes分期有增高趋势，差异有统计学意义(P<0.005)。结论：在结直肠癌的发病机制中，TobmRNA
2、可能为致癌基因。 关键词：结直肠癌；TobmRNA AssociationofTobmRNAExpressionwithClinicopathologicalCharacteristicsofColorectalCancer Abstract：Objective：ToinvestigatetheexpressionofTobmRNAinhumancolorectalcancertissues,andtheircorrespondingpara-canceroustissues,andtoinvestigatetheroleofTo
3、bmRNAinthepathogenesisofcolorectalcancer.Method：QuantitativerealtimeRT-PCRwasusedtodetecttheexpressionofTobmRNAin38colorectalcancers.Result：ComparedtothosefromcorrespondingnormaltissuestheexpressionofTobmRNAincolorectalcancertissuesweresignificantlyincreased.Moreover,the
4、expressionvalueofTobinDukesA,B,C,Dwas8.32±1.90,6.90±1.43,6.01±1.25and3.48±0.69，respectively.Analyzedbyone-wayANOVA,thereweresignificantdifferencesintheexpressionofTobindefferentDukesstage.Conclusion：Theup-regulationexpressionofTobmRNAmaybecloselyassociatedwithtumorigenes
5、isofcolorectalcarcinoma. Keywords：Colorectalcancer；TobmRNA Tob基因是抗增殖基因，可抑制细胞的增殖［1］，最近的研究表明：在肺癌的发病机制中Tob可能为抑癌基因［2］。但是，结直肠癌组织Tob基因的表达情况国内外未见报道。基于此，我们采用荧光定量RT-PCR技术检测了38例结直肠癌、癌旁正常组织TobmRNA的表达，并初步探讨其参与结直肠癌发生发展的机制。 1材料与方法4 1．1材料：38例癌组织及相应的癌旁正常组织（距肿瘤10cm以上）取自我院2003年7月至2005
6、年1月外科手术切除的大肠癌新鲜标本，均经病理证实。患者年龄35～76岁，平均56岁；男17例，女21例。根据Newland（1981）Dukes分期法，A期9例，B期17例，C期8例，D期4例。所有病例术前均未经过放疗和化疗。组织取材后立即放入液氮内冷冻，－70℃冰箱保存。 1.2试剂及仪器：Trizol试剂盒(GIBCO,USA),RT-PCR试剂盒(MBI公司),PCR试剂盒(MBI公司)，DEPC（GIBCO,USA）,dNTP(MBI公司)，GAPDH内对照试剂盒(ABI,USA)，FTC2000实时荧光定量基因扩增仪（枫岭公
7、司，加拿大）。 1.3引物设计：Tob基因上游引物：5’－CCAGTACAGTAATGCCTTTGATGT-3’,下游引物：5’－CCGTGCATTTTAACTTGTACGAT-3’,探针：5’－CATTGAGGCCTCCATAGGCTGC-3’,内参照GAPDH上游引物:5’-GGCATGGACTGTGGTCATGA-3’,下游引物5’－TGGGTGTGAACCACGAGAAC－3’，探针：5’－CTGCACCACCAACTGCTTAGC－3’，上述引物由上海生物工程技术服务公司合成。 1.4总RNA提取及cDNA制备：按照TRi
8、zol试剂盒说明提取结直肠癌组织、癌旁正常组织总RNA，RNA纯度为：OD260/OD280>1.8。每个总RNA样品取5μl，加1μl（0.2μg/μl）随机引物，加6μlDEPC水，混匀后瞬时离心
