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1、TobmRNA在结直肠癌组织表达的临床病理学意义作者:霍志斌,王淑霞,吴殿超,肖琦海,翟同善,周总光【关键词】结直肠癌 摘要:目的:研究TobmRNA在结直肠癌组织及其相应的癌旁正常组织的表达,探讨其在结直肠癌发生发展中的作用。方法:用荧光定量RT-PCR方法,检测38例结直肠癌标本及其相应的癌旁正常组织TobmRNA的表达。结果:38例癌组织TobmRNA表达高于癌旁正常组织(P<0.005);TobmRNA表达随着Dukes分期有增高趋势,差异有统计学意义(P<0.005)。结论:在结直肠癌的发病机制中,TobmRNA可能为致癌基因。 关键词:结直肠癌;Tobm
2、RNA AssociationofTobmRNAExpressionwithClinicopathologicalCharacteristicsofColorectalCancer Abstract:Objective:ToinvestigatetheexpressionofTobmRNAinhumancolorectalcancertissues,andtheircorresponding8para-canceroustissues,andtoinvestigatetheroleofTobmRNAinthepathogenesisofcolorectalcancer.Meth
3、od:QuantitativerealtimeRT-PCRwasusedtodetecttheexpressionofTobmRNAin38colorectalcancers.Result:ComparedtothosefromcorrespondingnormaltissuestheexpressionofTobmRNAincolorectalcancertissuesweresignificantlyincreased.Moreover,theexpressionvalueofTobinDukesA,B,C,Dwas8.32±1.90,6.90±1.43,6.01±1.25an
4、d3.48±0.69,respectively.Analyzedbyone-wayANOVA,thereweresignificantdifferencesintheexpressionofTobindefferentDukesstage.Conclusion:Theup-regulationexpressionofTobmRNAmaybecloselyassociatedwithtumorigenesisofcolorectalcarcinoma. Keywords:Colorectalcancer;TobmRNA Tob基因是抗增殖基因,可抑制细胞的增殖[1],最近的研究表
5、明:在肺癌的发病机制中Tob可能为抑癌基因[2]。但是,结直肠癌组织Tob基因的表达情况国内外未见报道。基于此,我们采用荧光定量RT-PCR技术检测了38例结直肠癌、癌旁正常组织TobmRNA的表达,并初步探讨其参与结直肠癌发生发展的机制。 1材料与方法8 1.1材料:38例癌组织及相应的癌旁正常组织(距肿瘤10cm以上)取自我院2003年7月至2005年1月外科手术切除的大肠癌新鲜标本,均经病理证实。患者年龄35~76岁,平均56岁;男17例,女21例。根据Newland(1981)Dukes分期法,A期9例,B期17例,C期8例,D期4例。所有病例术前均未经过放疗和化疗。组
6、织取材后立即放入液氮内冷冻,-70℃冰箱保存。 1.2试剂及仪器:Trizol试剂盒(GIBCO,USA),RT-PCR试剂盒(MBI公司),PCR试剂盒(MBI公司),DEPC(GIBCO,USA),dNTP(MBI公司),GAPDH内对照试剂盒(ABI,USA),FTC2000实时荧光定量基因扩增仪(枫岭公司,加拿大)。 1.3引物设计:Tob基因上游引物:5’-CCAGTACAGTAATGCCTTTGATGT-3’,下游引物:5’-CCGTGCATTTTAACTTGTACGAT-3’,探针:5’-CATTGAGGCCTCCATAGGCTGC-3’,内参照GAPDH上游引物
7、:5’-GGCATGGACTGTGGTCATGA-3’,下游引物5’-TGGGTGTGAACCACGAGAAC-3’,探针:5’-CTGCACCACCAACTGCTTAGC-3’,上述引物由上海生物工程技术服务公司合成。 1.48总RNA提取及cDNA制备:按照TRizol试剂盒说明提取结直肠癌组织、癌旁正常组织总RNA,RNA纯度为:OD260/OD280>1.8。每个总RNA样品取5μl,加1μl(0.2μg/μl)随机引物,加6μlDEPC水,混匀后瞬时