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时间:2018-11-29
《tob mrna在结直肠癌组织表达的临床病理学意义》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、TobmRNA在结直肠癌组织表达的临床病理学意义作者:霍志斌,王淑霞,吴殿超,肖琦海,翟同善,周总光【关键词】结直肠癌 摘要:目的:研究TobmRNA在结直肠癌组织及其相应的癌旁正常组织的表达,探讨其在结直肠癌发生发展中的作用。方法:用荧光定量RT-PCR方法,检测38例结直肠癌标本及其相应的癌旁正常组织TobmRNA的表达。结果:38例癌组织TobmRNA表达高于癌旁正常组织(P<0.005);TobmRNA表达随着Dukes分期有增高趋势,差异有统计学意义(P<0.005)。结论:在结直肠癌的发病机制中,TobmRNA可能为致癌
2、基因。 关键词:结直肠癌;TobmRNA AssociationofTobmRNAExpressionRNAinhumancolorectalcancertissues,andthEircorrespondingpara-canceroustissues,andtoinvestigatetheroleofTobmRNAinthepathogenesisofcolorectalcancer.Method:QuantitativerealtimeRT-PCRRNAin38colorectalcancers.Result:paredtothosef
3、romcorrespondingnormaltissuestheexpressionofTobmRNAincolorectalcancertissuesRNAmaybecloselyassociatedorigenesisofcolorectalcarcinoma. KeyRNA Tob基因是抗增殖基因,可抑制细胞的增殖[1],最近的研究表明:在肺癌的发病机制中Tob可能为抑癌基因[2]。但是,结直肠癌组织Tob基因的表达情况国内外未见报道。基于此,我们采用荧光定量RT-PCR技术检测了38例结直肠癌、癌旁正常组织TobmRNA的表达,并初步
4、探讨其参与结直肠癌发生发展的机制。 1材料与方法 1.1材料:38例癌组织及相应的癌旁正常组织(距肿瘤10cm以上)取自我院2003年7月至2005年1月外科手术切除的大肠癌新鲜标本,均经病理证实。患者年龄35~76岁,平均56岁;男17例,女21例。根据Nein,冰上冷却5min,加入4μl5×逆转录缓冲液、2μl10mmol/LdNTP混合物、1μlRNA酶抑制剂、1μl反转录酶,反应终体积为20μl,20℃反应5min、42℃反应60min、70℃反应5min,冰上冷却后置于-20℃贮存备用。 1.5荧光定量PCR反应:依次取10×P
5、CR缓冲液3μl、25mmol/LMgCl23μl、25mmol/LdNTP0.36μl、5’和3’引物各1μl、TaqMan探针1μl(10μmol/L)、Taq酶(5u/μl)0.3μl、ddH2O18.34μl、模板cDNA5μl加入0.5mlEP管至终体积30μl。94℃预变性2min。然后按94℃20s、53℃30s、60℃60s进行45个循环的PCR反应,53℃30s收集荧光。 1.6定量分析:用TobmRNACt值/内参照GAPDHCt值代表TobmRNA的精确含量。 1.7统计学处理:Tob基因表达以均数±标准差表示,用SPS
6、S11.5统计软件统计,配对t检验及单因素方差分析,以P<0.05认为差异有统计学意义。 2结果 2.1根据定量荧光PCR原理Ct值与扩增片断的实际拷贝数呈反比,即Ct值越低,实际含量越高。结直肠癌组织TobmRNA表达值为6.89±1.90高于癌旁正常组织(7.84±2.00,p<0.005)。 2.2TobmRNA表达与临床病理特征的关系:结直肠癌组织TobmRNA表达随着Dukes分期越晚其表达有增高趋势,淋巴结转移组结直肠癌组织TobmRNA的表达高于无淋巴结转移组癌组织,但TobmRNA表达与患者的性别、年龄、肿瘤的分化程度
7、无关。(表1) 3讨论 结直肠癌是我国常见的恶性肿瘤,其发生发展是一个多步骤、多阶段及多基因参与的疾病,癌基因和抑癌基因表达失衡可导致肿瘤的发生[3]。认识大肠癌分子水平的改变将有助于结直肠癌的筛选、诊断、预后的判断和基因治疗。 Tob基因是抗增殖基因,可抑制细胞的增殖,最近的研究表明:在肺癌的发病机制中Tob可能为抑癌基因。我们用荧光定量RT-PCR方法检测了38例结直肠癌组织及癌旁正常组织TobmRNA表达。结果表明TobmRNA在结直肠癌组织的表达明显高于癌旁正常组织,且随着Dukes分期越晚TobmRNA表达越高,这提示TobmRN
8、A高表达促进了结直肠癌的发生和浸润,其生物学功能表现为致癌基因,可能是结直肠癌的检测指标之一。TobmRNA在结直肠癌的表达和肺癌不同,
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