tob mrna在结直肠癌组织表达的临床病理学意义

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1、TobmRNA在结直肠癌组织表达的临床病理学意义作者：霍志斌，王淑霞，吴殿超，肖琦海，翟同善，周总光【关键词】结直肠癌　　摘要：目的：研究TobmRNA在结直肠癌组织及其相应的癌旁正常组织的表达，探讨其在结直肠癌发生发展中的作用。方法：用荧光定量RT-PCR方法，检测38例结直肠癌标本及其相应的癌旁正常组织TobmRNA的表达。结果：38例癌组织TobmRNA表达高于癌旁正常组织（P<0.005）；TobmRNA表达随着Dukes分期有增高趋势，差异有统计学意义(P<0.005)。结论：在结直肠癌的发病机制中，TobmRNA可能为致癌

2、基因。　　关键词：结直肠癌；TobmRNA　　AssociationofTobmRNAExpressionRNAinhumancolorectalcancertissues,andthEircorrespondingpara-canceroustissues,andtoinvestigatetheroleofTobmRNAinthepathogenesisofcolorectalcancer.Method：QuantitativerealtimeRT-PCRRNAin38colorectalcancers.Result：paredtothosef

3、romcorrespondingnormaltissuestheexpressionofTobmRNAincolorectalcancertissuesRNAmaybecloselyassociatedorigenesisofcolorectalcarcinoma.　　KeyRNA　　Tob基因是抗增殖基因，可抑制细胞的增殖［1］，最近的研究表明：在肺癌的发病机制中Tob可能为抑癌基因［2］。但是，结直肠癌组织Tob基因的表达情况国内外未见报道。基于此，我们采用荧光定量RT-PCR技术检测了38例结直肠癌、癌旁正常组织TobmRNA的表达，并初步

4、探讨其参与结直肠癌发生发展的机制。　　1材料与方法　　1．1材料：38例癌组织及相应的癌旁正常组织（距肿瘤10cm以上）取自我院2003年7月至2005年1月外科手术切除的大肠癌新鲜标本，均经病理证实。患者年龄35～76岁，平均56岁；男17例，女21例。根据Nein，冰上冷却5min，加入4μl5×逆转录缓冲液、2μl10mmol/LdNTP混合物、1μlRNA酶抑制剂、1μl反转录酶，反应终体积为20μl，20℃反应5min、42℃反应60min、70℃反应5min，冰上冷却后置于－20℃贮存备用。　　1.5荧光定量PCR反应：依次取10×P

5、CR缓冲液3μl、25mmol/LMgCl23μl、25mmol/LdNTP0.36μl、5’和3’引物各1μl、TaqMan探针1μl（10μmol/L）、Taq酶（5u/μl）0.3μl、ddH2O18.34μl、模板cDNA5μl加入0.5mlEP管至终体积30μl。94℃预变性2min。然后按94℃20s、53℃30s、60℃60s进行45个循环的PCR反应，53℃30s收集荧光。　　1.6定量分析：用TobmRNACt值/内参照GAPDHCt值代表TobmRNA的精确含量。　　1.7统计学处理：Tob基因表达以均数±标准差表示，用SPS

6、S11.5统计软件统计，配对t检验及单因素方差分析，以P＜0.05认为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1根据定量荧光PCR原理Ct值与扩增片断的实际拷贝数呈反比，即Ct值越低，实际含量越高。结直肠癌组织TobmRNA表达值为6.89±1.90高于癌旁正常组织(7.84±2.00,p<0.005)。　　2.2TobmRNA表达与临床病理特征的关系：结直肠癌组织TobmRNA表达随着Dukes分期越晚其表达有增高趋势，淋巴结转移组结直肠癌组织TobmRNA的表达高于无淋巴结转移组癌组织，但TobmRNA表达与患者的性别、年龄、肿瘤的分化程度

7、无关。（表1)　　3讨论　　结直肠癌是我国常见的恶性肿瘤，其发生发展是一个多步骤、多阶段及多基因参与的疾病，癌基因和抑癌基因表达失衡可导致肿瘤的发生［3］。认识大肠癌分子水平的改变将有助于结直肠癌的筛选、诊断、预后的判断和基因治疗。　　Tob基因是抗增殖基因，可抑制细胞的增殖，最近的研究表明：在肺癌的发病机制中Tob可能为抑癌基因。我们用荧光定量RT-PCR方法检测了38例结直肠癌组织及癌旁正常组织TobmRNA表达。结果表明TobmRNA在结直肠癌组织的表达明显高于癌旁正常组织，且随着Dukes分期越晚TobmRNA表达越高，这提示TobmRN

8、A高表达促进了结直肠癌的发生和浸润，其生物学功能表现为致癌基因，可能是结直肠癌的检测指标之一。TobmRNA在结直肠癌的表达和肺癌不同，