胎盘组织中Human AnnexinV的表达及与HBV感染的关系.doc

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1、胎盘组织中HumanAnnexinV的表达及与HBV感染的关系作者：张润驹，岳亚飞，李淑红，石紫云，叶峰，归巧娣，石磊【关键词】乙型肝炎病毒(HBV)摘要：目的观察HumanAnnexinV(HAV)在胎盘组织中的表达，并探讨其在乙型肝炎病毒(HBV)感染胎盘中的可能作用。方法用免疫荧光染色法检测早孕绒毛，中孕和足月胎盘绒毛中HAV的表达；用免疫荧光双重染色法观察HBV感染的胎盘组织HBsAg和HAV的分布及相互关系。结果①所有的标本绒毛滋养层细胞、绒毛间质细胞、毛细血管内皮细胞都有HAV的存在。②HBV感染的胎盘绒毛中只要是HBsAg阳性

2、的部位同时一定有HAV的表达，阳性信号存在于滋养层细胞、绒毛间质细胞、绒毛毛细血管内皮细胞中。结论HAV可能作为HBsAg的特异性受体介导了HBV与胎盘组织各层细胞的粘附、内化等过程并最终导致了HBV对胎盘的感染。　　关键词：胎盘；病毒受体；人膜联蛋白(HAV)；乙型肝炎病毒(HBV)　　ExpressionofHumanAnnexinＶinplacentaanditseffectsonplacentainfectedbyHBV　　ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheexpressionofHumanAnne

3、xinV(HAV)inplacentaandtoexplorethepossibleroleofitinHBVinfectedplacenta.MethodsHAVwasdetectedinplacentasthathadbeenprovedinfectedwithHBVwithimmunofluorescenceassaysandthedoublelabelimmunofluorescenceassayswereusedtodetectHBsAgandHAVinthesameplacenta.Confocallaserscanningmi

4、croscopewasalsousedtoobservetheresult.Results①HAVwasexpressedonearlyperiod,metaphaseandtermvilli.Itwasexpressedontrophoblasticcell,interstitialcellandendotheliumcellofinterstitialbloodvesselsofvilli.TheresulthadnorelationwiththeinfectionofHBVandthetimeofpregnancy.②Thedoubl

5、elabelimmunofluorescenceassaysshowedthepositiveareaofHBsAginplacentasaccordedwiththeareaofHAV.ConclusionHAVmediatedHBVintocellsofplacentaasspecificreceptorandresultedininfection.　　KEYWORDS:placenta;viralreceptor;humanannexinV(HAV);hepatitisBvirus(HBV)5　　我国为乙肝高感染区，HBsAg携带者高

6、达1.2亿，其中50%以上为母婴传播所致。而HBV宫内感染是母婴传播的重要途径，感染率可高达40%以上[1]。目前普遍认为HBV宫内感染主要经胎盘感染而致，即孕妇绒毛间隙血中的HBV感染绒毛滋养层细胞、绒毛间质细胞、绒毛毛细血管内皮细胞后感染胎儿[2]，但具体机理现仍不清楚。HBV感染肝脏的研究表明，HBV也同其他的病毒一样，首先通过病毒外膜蛋白识别肝脏细胞质膜上的受体[3]，和靶细胞上的受体结合，附着于细胞表面，在病毒受体的介导下，进入细胞进行复制。有研究发现人膜联蛋白V(HumanAnnexinV,HAV)是肝细胞膜上与HBV感染有关的

7、受体[4]。并且在胎盘组织中也检测到HAV[5]，那么HBV感染胎盘各类细胞是否也与HAV有关？为此，我们对正常的不同孕期胎盘和足月HBV感染的胎盘中HAV及HBsAg表达应用免疫荧光双标记技术进行检测，以了解其分布和相互关系，并探讨HAV在HBV感染胎盘中的可能作用。　　1材料与方法　　1.1材料2003年3月至2004年3月，收集在西安交通大学第一医院住院分娩的产前检查及复查血清中HBsAg阳性(其中大三阳12例，小三阳15例)孕妇足月分娩胎盘27例。同时随机收集3例HBV血清标志物阴性的正常足月胎盘；另外取人工流产及住院治疗性中期引产

8、的HBV血清标志物阴性的孕妇绒毛和胎盘各3例。鼠抗人乙肝病毒表面抗原(HBsAg)单克隆抗体(一抗)、FITC标记兔抗山羊IgG(二抗)、罗丹明标记山羊抗小鼠IgG(二抗)购于北