胎盘组织中human annexinv的表达及与hbv感染的关系

《胎盘组织中human annexinv的表达及与hbv感染的关系》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、胎盘组织中HumanAnnexinV的表达及与HBV感染的关系作者：张润驹，岳亚飞，李淑红，石紫云，叶峰，归巧娣，石磊【关键词】乙型肝炎病毒(HBV)摘要：目的观察HumanAnnexinV(HAV)在胎盘组织中的表达，并探讨其在乙型肝炎病毒(HBV)感染胎盘中的可能作用。方法用免疫荧光染色法检测早孕绒毛，中孕和足月胎盘绒毛中HAV的表达；用免疫荧光双重染色法观察HBV感染的胎盘组织HBsAg和HAV的分布及相互关系。结果①所有的标本绒毛滋养层细胞、绒毛间质细胞、毛细血管内皮细胞都有HAV的存在。②HBV感染

2、的胎盘绒毛中只要是HBsAg阳性的部位同时一定有HAV的表达，阳性信号存在于滋养层细胞、绒毛间质细胞、绒毛毛细血管内皮细胞中。结论HAV可能作为HBsAg的特异性受体介导了HBV与胎盘组织各层细胞的粘附、内化等过程并最终导致了HBV对胎盘的感染。　　关键词：胎盘；病毒受体；人膜联蛋白(HAV)；乙型肝炎病毒(HBV)　　ExpressionofHumanAnnexinＶinplacentaanditseffectsonplacentainfectedbyHBV　　ABSTRACT:ObjectiveToinv

3、estigatetheexpressionofHumanAnnexinV(HAV)inplacentaandtoexplorethepossibleroleofitinHBVinfectedplacenta.MethodsHAVmunofluorescenceassaysandthedoublelabelimmunofluorescenceassayseplacenta.Confocallaserscanningmicroscopeetaphaseandtermvilli.Itcellofinterstiti

4、albloodvesselsofvilli.Theresulthadnorelationeofpregnancy.②ThedoublelabelimmunofluorescenceassaysshoediatedHBVintocellsofplacentaasspecificreceptorandresultedininfection.　　KEY)上观察并拍照。用于FITC的激发波长为495nm。用PBS取代山羊抗人膜联蛋白V多克隆抗体作为空白对照。　　1.2.2HBsAg和HumanAnnexinV免疫荧光

5、双标染色经SP免疫组化法检测出22例胎盘HBsAg阳性，用免疫荧光双标染色观察胎盘组织中HBsAg和HumanAnnexinV的分布。①切片常规脱蜡至水；②加入尿素，室温30min后，蒸馏水洗1次；③加1∶50稀释的鼠抗人乙肝病毒表面抗原单克隆抗体和1∶50稀释的山羊抗人膜联蛋白V多克隆抗体，4℃过夜；④滴加1∶100稀释的TRITC标记的山羊抗鼠IgG和1∶100稀释的FITC标记的兔抗山羊IgG，37℃1h；⑤无荧光缓冲甘油封片。以上各步间均为PBS洗5min×3次。在型号为LEiCaTCSSP2的激光共

6、聚焦扫描显微镜(LSCM)上观察并拍照。FITC的激发波长为495nm，TRITC的激发波长为546nm。　　1.3结果判断标准HBsAg阳性部位发红色荧光，HumanAnnexinV阳性部位发绿色荧光，HBsAg和HumanAnnexinV的重叠处发黄色荧光。　　2结果　　2.1不同孕周胎盘HumanAnnexinV的表达和分布应用免疫荧光染色方法检测血清HBsAg阴性早孕绒毛3例、中期引产胎盘3例、足月胎盘3例和血清HBsAg阳性的足月孕妇娩出的胎盘3例HumanAnnexinV的表达、分布。发现无论妊娠

7、时间长短、感染HBV与否，所有标本的绒毛滋养层细胞、绒毛间质细胞、间质内血管内皮细胞都有HumanAnnexinV的表达(图1)。空白对照未显示阳性信号。　　图1免疫荧光染色绒毛滋养层细胞、绒毛间质细胞、间质内毛细血管内皮细胞HAV阳性表达呈绿色荧光（略）　　Fig.1ImmunofluorescencestaningofHAVintrophoblasticcells,villousmesenchymalcellsandvillouscapillaryendothelialcells,HAVpositivei

8、singreen(10×40)　　2.2HBsAg和HumanAnnexinV在胎盘的分布对HBsAg阳性的22例胎盘组织采用免疫荧光双标染色方法检测HBsAg和HumanAnnexinV在胎盘分布情况。发现胎盘绒毛中HBsAg、HumanAnnexinV和HBsAg+HumanAnnexin均有阳性表达，阳性信号存在于滋养层细胞、绒毛间质细胞、绒毛毛细血管内皮细胞(图2)。空白对照未显示阳性信号。